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目的:采用薄芝糖肽处理以miR-203的模拟物和抑制物转染前后的HaCaT细胞,根据TAp63、SOCS3、STAT3及角蛋白表达量的变化,明确miR-203对TAp63和SOCS3的靶向作用和对STAT3信号通路的调控以及在KC增殖和分化中的作用;探讨薄芝糖肽对KC增殖和分化的干预作用机制。方法:1.以 miR-203 的模拟物和抑制物(miR-203 mimic 和 miR-203 inhibitor)定量转染人角质形成细胞HaCaT细胞系,以薄芝糖肽溶液处理转染前后的HaCaT细胞;2.采用qRT-PCR测定转染前后及薄芝糖肽溶液处理前后HaCaT细胞中TAp63、SOCS3、STA T3 mRNA 的表达水平;3.采用 Western blot 方法测定miR-203 mimic 和 miR-203 inhibitor 转染前后和薄芝糖肽溶液处理前后各组HaCaT细胞中TAp63、SOCS3、STAT3、K10和K16蛋白的表达;4.通过数据处理及分析明确miR-203对KC增殖和分化的调控作用及薄芝糖肽的干预机制。结果:1.qRT-PCR结果分析显示,与对照组相比,miR-203 mimic组TAp63、SOCS3 mRNA表达下调,STAT3 mRNA表达上调,miR-203 inhibitor组表达结果与此相反;与未加入薄芝糖肽组相比,薄芝糖肽组TAp63、SOCS3、STAT3 mRNA表达无明显影响。2.Western blot 结果显示,与对照组相比,miR-203 mimic 组 TAp63、SOCS3、STAT3蛋白表达下降,K10及K16表达显著上调;miR-203 inhibitor组TAp63蛋白、SOCS3蛋白、K16表达上调,STAT3蛋白及K10表达下降。与未加入薄芝糖肽组相比,薄芝糖肽组TAp63蛋白表达上调,SOCS3蛋白、STAT3蛋白以及K10、K16表达水平明显下调。3.miR-203 mimic+薄芝糖肽组与 miR-203 mimic 组相比,TAp63 蛋白、SOCS3蛋白的表达上调,miR-203 inhibitor+薄芝糖肽组与miR-203 inhibitor组相比,TAp63蛋白、SOCS3蛋白的表达下调。结论:1.HaCaT细胞中miR-203通过靶向作用负向调节TAp63和SOCS3的表达,通过JAK/STAT信号通路正相调节STAT3 mRNA的表达,但STAT3蛋白表达不受miR-203变化的影响,提示正常生理状态下KC能够通过多种机制(信号通路)调节STAT3蛋白的表达,从而使其表达处于稳定状态,维持细胞稳态;2.HaCaT中K10的表达与miR-203水平呈正相关,K16的表达不受miR-203变化的影响;3.薄芝糖肽能够双向干预miR-203对TAp63和SOCS3的调节作用,并在转录和翻译水平干预miR-203对STAT3的作用,降低STAT3的表达从而抑制KC的增殖;4.薄芝糖肽通过上调TAp63,下调SOCS3、STAT3、K10和K16双向调节KC的增殖和分化,结果分析显示,其促分化作用强于促增殖作用。