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本文由两部分构成。第一部分是关于成年大鼠5-羟色胺、5-羟色胺2A受体参与中枢呼吸调节的初步研究。第二部分是关于卵巢切除术后大鼠垂体前叶生长相关蛋白-43免疫反应性及其与促性腺激素细胞的关系。
位于新生和成年哺乳动物延髓腹外侧区的前包钦格复合体(pre-B(o)tzingercomplex，pre-B(o)tC)被认为是呼吸节律产生中枢。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)作为一种重要的神经递质，在感觉和运动功能的调控中发挥关键作用，其中也包括对呼吸节律的调节。基于目前诸多不同的电生理实验结果而又缺乏基本的、必要的形态学实验基础，我们试图阐明5-HT、5-HT2A受体(5-HT2Areceptor，5-HT2AR)与pre-B(o)tC神经元之间的关系，为5-HT参与呼吸节律的调控提供形态学实验依据。神经激肽1受体(neurokinin-1receptor，NK1R)已经被广泛地用做pre-B(o)tC神经元的特异性标记物。本实验应用NK1R标记pre-B(o)tC神经元，采用免疫荧光组织化学和ABC法结合免疫金-银加强的免疫电镜双重标记技术，分别观察了成年正常和慢性间断性缺氧(chronicintermittenthypoxia，CIH)大鼠pre-B(o)tC内5-HT、5-HT2AR与NK1R免疫反应(immunoreactive，ir)神经元的关系。实验结果显示：在正常和CIH大鼠pre-B(o)tC内，NK1R-ir产物主要位于胞膜和树突膜内面，胞体内也有少量标记。免疫荧光双标记显示少部分5-HT-ir神经纤维与NK1R-ir神经元之间有密切接触，电镜下未发现有典型的突触联系。5-HT-ir终末与NK1R免疫阴性树突之间可形成典型的非对称性突触。5-HT2AR免疫反应性主要出现在胞体和突起，在胞膜上有明显标记，并与NK1R-ir神经元有密切接触。电镜下5-HT2AR-ir金颗粒主要分布于胞体和树突，膜下可见较多的金颗粒标记，部分5-HT2AR-ir神经元与NK1R共存。在CIH大鼠pre-B(o)tC内，5-HT2AR-ir金颗粒不仅仅分布在胞膜和树突膜下，在膜外或膜的凹陷处也可发现阳性标记，提示缺氧状态下5-HT2AR可能处于较正常更加活跃的功能状态，以应答缺氧对呼吸的调节。综上所述，我们推测5-HT系统可能通过两种途径参与pre-B(o)tC的呼吸调节：①间接途径：即5-HT-ir神经纤维可能通过兴奋NK1R-ir阴性的中间神经元，后者作用于NK1R-ir神经元以实现其呼吸调控作用；②直接途径：5-HT-ir神经纤维也可能直接作用于NK1R-ir神经元上的5-HT2AR以调节呼吸。尽管尚未发现5-HT-ir神经纤维与NK1R-ir神经元的突触联系，但是两者之间的密切接触，以及NK1R和5-HT2AR的共存关系，提示直接途径存在的可能性，但有待于进一步实验证实。缺氧可能进一步激活了5-HT/5-HT2AR系统，致使5-HT2AR处于更加活跃的功能状态，以应答缺氧对呼吸的干预。
哺乳动物垂体前叶存在着数量较多的P物质(substanceP,SP)、降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide，CGRP)等肽能神经纤维。这些肽能神经纤维多分布于腺细胞间，而不是血管周，并与腺细胞形成典型的突触结构，为“哺乳动物垂体前叶神经-体液双重调节”假说提供了形态学依据。本实验应用免疫组化、免疫荧光双重标记方法，观察卵巢切除术后第4天和第15天大鼠垂体前叶GAP-43-ir神经纤维的数量变化，及其与SP-ir神经纤维和促性腺激素(folliclestimulatinghormone，FSH)-ir细胞的关系，旨在明确外周内分泌干预后，是否激发了垂体前叶神经纤维的芽生，以及这些神经纤维与受干预的激素分泌腺细胞以及肽能神经纤维的关系。结果：正常大鼠垂体前叶很少有GAP-43-ir神经纤维。卵巢切除后4d垂体前叶出现了数量较多的GAP-43-ir神经纤维，术后15d神经纤维明显增多，多走行于腺细胞间，少量神经纤维与FSH细胞密切接触。GAP-43-ir神经纤维与SP共存。由此我们得出推论，外周内分泌干预后，垂体前叶的神经纤维可通过芽生增加纤维数量，以对机体内分泌状态改变作出积极的应答。神经纤维可能直接作用于腺细胞，但更大的可能性是通过旁分泌方式实现对腺细胞的调节。