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目的观察siRNA介导的RNA干扰(RNAi)对宫颈癌细胞株HeLa中CD59基因表达的影响以及裸鼠卵巢癌移植瘤的抑瘤效应,探讨CD59在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法设计并合成3对编码CD59 shRNA的单链寡核苷酸,退火后将双链寡核苷酸与线形pSUPER表达载体连接构建成重组质粒,并以无关序列作为对照,脂质体法转染包装细胞系Phoenix A,收集病毒上清,感染HeLa细胞,RT-PCR和Western blots筛选出抑制效率最高的序列siCD59,荧光染料释放试验检测CD59功能的改变;siCD59稳定转染卵巢癌细胞株A2780,并以siCD59-C作为对照,体外观察CD59基因改变后对补体溶破的抵抗作用的变化;流式细胞仪测定活性caspase-3的表达,Hoechst染色测定细胞核的改变;将两种卵巢癌细胞注射到4-5周龄的雌性裸鼠体内建立裸鼠移植瘤模型,动态观测移植瘤生长情况,计算肿瘤生长率,6-8周处死裸鼠取部分移植瘤组织做免疫组织化学染色检测CD59蛋白的表达。结果成功构建4条重组载体(包括1条对照),发现其中2条(siCD59-T2 andsiCD59-T3)能够有效抑制CD59基因的表达。RT-PCR结果显示转染siCD59-T2和siCD59-T3(siCD59)组mRNA的表达分别下降到原来的42.60%(P＜0.01)和49.23%(P＜0.01)。Western blot检测CD59蛋白的表达量分别下降到原来的51.61%(P＜0.05)和52.18%(P＜0.05)。在1:5,1:10,1:20不同补体稀释度下,siCD59和siCD59-C染料释放率分别为96.03%和40.40%,86.83%和30.97%,66.83%和19.51%,差别有统计学意义。siCD59组活性caspase-3的表达和siCD59-C相比增加了62.42%,且高致密性核、碎裂核比siCD59-C组多201.19%;同时,siCD59组裸鼠移植瘤的重量(0.27+0.092)明显比siCD59-C组(1.57±0.176)轻,抑瘤率为82.80%;且siCD59组阳性染色细胞(296±70)明显少于siCD59-C(814±1 12)组,差别有统计学意义。结论siRNA介导的RNAi能有效抑制CD59基因的表达,并能增加补体介导的溶细胞活性及诱导细胞凋亡,抑制裸鼠体内卵巢癌移植瘤的生长,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础,可望为肿瘤的免疫治疗开辟新途径。