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目的宫颈癌是发展中国家妇女最常见的恶性肿瘤,其发病率占女性生殖器官恶性肿瘤的首位。近年来随着分子生物学的发展,国内外研究报道：一些类型钾离子通道在宫颈癌中大量表达,并与宫颈癌发生发展密切相关。因此,对钾离子通道的研究已引起临床的高度重视。钾离子通道是镶嵌在细胞膜脂质中的蛋白复合体,应用分子生物学技术来检测细胞周期蛋白如cyclinD,细胞信号通道及DNA合成等都证明钾通道阻断剂能够抑制细胞周期G1期的进展。钙离子激活钾离子通道,目前已知存在3种不同的亚单位：高电导钙离子激活钾离子通道(BKCa)、中电导钙离子激活钾离子通道(IKCa)、低电导钙离子激活钾离子通道(SKCa)。有研究报道钙离子激活钾离子通道在多种肿瘤细胞中有表达,如前列腺癌、神经胶质细胞瘤、胃癌、胰腺癌、垂体瘤、乳腺癌、直肠癌和结肠癌。在宫颈癌细胞系中有表达,而其在宫颈癌活体组织中的表达情况如何,与细胞增殖、分化和预后有何关系尚不清楚。因此,本研究选取BKCa检测其在正常宫颈组织和宫颈癌及宫颈癌放化疗前后组织中的表达情况,探讨BKCa基因表达与宫颈癌发生,发展的关系及放化疗对其影响。材料与方法一、实验材料1、标本取自中国医科大学附属第一医院妇科2006年至2009年间病理证实为宫颈癌标本30例,正常宫颈组织标本10例,同一宫颈癌患者治疗前及放化疗两周时标本10对,将这些新鲜组织贮存于—80摄氏度冰箱中保存,以供日后提取RNA所用。宫颈癌患者的临床资料包括(1)年龄,(2)临床分期(FIGO),(3)组织学分类。2、试剂RNAiso Reagent(Total RNA提取试剂),TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0[宝生物工程(大连)有限公司],BKCa及β-actin上游及下游特异性引物由日本TaKaRa公司合成。二、实验方法RT-PCR技术三、结果判定BKCa mRNA通过PCR仪扩增后,行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,并通过测量灰度值对其进行半定量分析。四、统计学处理所有数据资料用SPSS13.0进行处理,各组计量资料的结果采用t检验,P<0.05有统计学意义。结果1、正常宫颈组织和宫颈癌中BKCa mRNA的表达BKCa mRNA在正常宫颈组织中的表达的灰度值的比值为0.6720,与宫颈癌组织中的1.2464相比,有显著性差异(P=0.001)2、宫颈癌的各种临床病理因素间的BKCa mRNA的关系BKCa mRNA在G1期中表达为0.9943、G2期为1.1360,与G3期的1.5788相比有显著性差异(P=0.002),BKCa mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为1.0842,在Ⅲ-Ⅳ期中表达为3.5688,两者有显著性差异(P=0.001)。在年龄≥50岁组BKCamRNA的表达为1.2207与年龄<50岁组的1.2918比较,二者之间无显著性差异(P=0.658)3、放化疗前及放化疗两周时BKCa mRNA的表达BKCa mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.1359,放化疗两周时BKCa mRNA表达为0.5730相比,二者相比有显著性差异(P<0.001)结论1、BKCa基因参与宫颈癌恶性增殖过程,提示BKCa通道与宫颈癌细胞增值有关。2、BKCa基因与宫颈癌的病理分级呈正相关,提示BKCa的激活与宫颈癌的预后不良相关。3、放化疗可抑制BKCa基因的表达。