LSD1在小鼠胚胎成纤维细胞重编程中的功能研究

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诱导型多能性干细胞(iPS细胞)是指将四个转录因子Oct4,Sox2,c-myc和K1f4转染进小鼠的胚胎成纤维细胞(MEFs)后得到类似胚胎干细胞的一类细胞,而iPS细胞的产生过程是一个细胞核重编程的过程,伴随着染色质结构的改变与重建。组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(LSD1)是组蛋白赖氨酸残基的去甲基化酶,作为染色质结构的调节因子可能在重编程过程中发挥作用。本研究探索了LSD1在iPS细胞产生过程中的作用,首先比较了LSD1蛋白在MEFs和ES细胞中的表达量,然后分别通过在重编程体系中过表达LSD1、加入RNAi和抑制剂的方法探索LSD1的功能,最后用免疫共沉淀、定量PCR的方法初步发现LSD1的作用机制。结果表明,LSD1在ES细胞中的表达量高于MEFs中,过表达LSD1对iPS细胞的形成效率没有影响,而RNAi抑制LSD1的表达和LSD1抑制剂tranylcypromine都能促进iPS细胞的形成,并且抑制剂tranylcypromine是在重编程早期发挥作用,免疫共沉淀实验表明LSD1和Oct4/Nanog有相互作用,并且LSD1调控Oct4下游基因的表达。LSD1发挥作用的时期和诱导早期细胞由间充质状态向上皮状态转化(MET)的时间点相一致,暗示LSD1可能通过与MET相关因子相互作用调控这一过程。本研究结果说明LSD1通过和Oct4/Nanog相互作用调控iPS细胞的形成。
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