【摘 要】
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昆虫能够感受空气中的挥发性物质，并依此作为寻偶、觅食和寻找产卵场所的信息。而昆虫触角感受器中的气味结合蛋白被认为是运输气味分子至嗅觉的受体，是昆虫专一性识别外界气味
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昆虫能够感受空气中的挥发性物质，并依此作为寻偶、觅食和寻找产卵场所的信息。而昆虫触角感受器中的气味结合蛋白被认为是运输气味分子至嗅觉的受体，是昆虫专一性识别外界气味物质的第一步生化反应，对于昆虫与外界进行信息交流具有重要意义。该论文开展了烟夜蛾触角普通气味结合蛋白2基因的克隆和表达研究。 根据已发表的其它昆虫的核苷酸序列设计引物，利用RT-PCR技术扩增了编码烟夜蛾雌雄虫触角普通气味结合蛋白2的cDNA片断，并通过TA克隆的方法将其克隆至pGEM-T Easy载体(GenBank登录号为AY351670)，获得了GOBP2基因成熟蛋白阅读框序列。将目的片断和原核表达载体pET-30a(+)经双酶BamHI／XhoI酶切重组到表达型质粒中，并转化入原核细胞中表达。序列测定结果表明，烟夜蛾触角普通气味结合蛋白基因的成熟蛋白阅读框全长489bp，编码162个氨基酸残基，预测分子量和等电点分别为18.2kDa和5.35。推导的氨基酸序列与已报道的10种昆虫普通气味结合蛋白2高度同源(74％～99％)，并具有气味结合蛋白的典型特征。其中与谷实夜蛾的同源性最高，11种昆虫GOBP2氨基酸的相似程度与这11种昆虫的亲缘关系并不完全一致。SDS-PAGE和Western印迹分析表明，经IPTG诱导，GOBP2基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，电泳检测到一条约23kDa大小的外源蛋白，与预测的融合蛋白分子量大小相应。 本研究将烟夜蛾普通气味结合蛋白2基因整合入原核表达载体表达，得到的重组蛋白在其N-端融合有His·Tag纯化标记，为下一步获得大量GOBPZ重组蛋白，研究GOBPZ蛋白的结构及配体的研究奠定了基础。
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