烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenee)滞育激素基因在大肠杆菌中的表达

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根据GenBank发表序列(AY052417)设计引物,以烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenee)滞育蛹为材料,利用RT-PCR技术从中扩增到滞育激素(diapause hormone,DH)基因cDNA.PCR产物经NdeⅠ/EcoRⅠ双酶切后,与同样双酶切的pET-30a(+)质粒连续并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,经检测筛选,成功得到阳性克隆.测序结果表明,重组载体的插入片段中含有DH、性信息素生物合成激活肽(pheromone biosyntheseis activating neuropeptide,PBAN)及三个食道下神经节肽(suboesophageal ganglion neuropeptide,SGNP)的完整的编码序列,且其阅读框架(reading frame)完全正确.该研究首次将DH基因整合入原核表达载体中表达,为大量获取DH重组蛋白,研究DH的结构及功能奠定了基础.
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