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目的:子痫前期(preeclampsia)是妊娠妇女特有的疾病，发病率在我国为9.4％，国外发病率为10％左右，它是导致孕产妇和围产儿死亡的主要原因。多年来发病原因不清，目前普遍认为与母胎免疫失衡，滋养叶细胞受损，胎盘浅着床，导致母体过度的炎症反应及全身血管内皮损伤有关。穿孔素(PFN)与颗粒酶(Gzm)主要由成熟的NK细胞(naturalkillercell)和激活的CTL(cytotoxicTlymphocyte)细胞合成，存在于NK细胞和活化的CTL细胞胞浆颗粒中。穿孔素是由534个氨基酸残基组成的糖蛋白，有很强的的溶细胞活性，分子量约60KD，蛋白结构和功能与溶细胞性补体蛋白C9相似，人类穿孔素基因定位于染色体10q22，它与颗粒酶，水解性溶酶体酶等共同组成的杀伤颗粒在CTL，NK细胞介导的细胞毒中起作用，是清除病毒感染靶细胞，肿瘤细胞、同种移植细胞的主要途径。颗粒酶是一组同源性的丝氨酸蛋白酶，包括GzmA，B，K，H等成员，其中GzmB具有天门冬氨酸酶的活性，是主要效应分子，能迅速引起靶DNA断裂。PFN和GzmB存在于活化的CTL和NK细胞胞浆颗粒中，是全身免疫的重要溶细胞效应分子,PFN和GzmB在重度子痫前期中的表达变化，国外鲜有研究，国内尚未见报道。
本研究应用半定量RT-PCR方法，检测PFN与GzmBmRNA在重度子痫前期患者及正常孕妇蜕膜中的表达情况，探讨其在子痫前期发病中作用。
方法:
一、研究对象
选择2009年12月-2011年3月在中国医科大学附属盛京医院产科住院分娩的重度子痫前期患者共30例为实验组，诊断和分类标准参照乐杰主编《妇产科学》（第7版）。孕妇年龄21-41(平均29.60士4.78)岁，孕周33-39(平均36.17士1.56)周；选取同期正常妊娠妇女30例为对照组，年龄21-38(平均29.45士4.50)岁，孕周34-39(平均37.03士1.22)周。所有对象均为剖宫产，各组孕妇均无原发性高血压、糖尿病、肝、肾疾病等，组间年龄、孕周、孕产次无显著性差异，具有可比性。
二、标本采集及RNA提取
剖宫产术中采集两组孕妇胎盘附着部位蜕膜组织，液氮罐运输，-70℃深冻冰箱保存。提取两组蜕膜组织中总RNA。
三、用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常孕妇和重度子痫前期患者蜕膜中PFN与GzmBmRNA的表达
将两组蜕膜中提取的RNA逆转录成cDNA后行PCR反应，PCR产物经琼脂糖凝胶电泳，成像，分析，以β-actin同时扩增作内参照。
四、统计学方法
应用SPSS17.0软件包进行统计学分析，实验数据以(?)士s表示。采用t检验进行两组之间的比较。P＜0.05为差异有统计学意义。
结果:
1、PFNmRNA在两组标本的蜕膜组织中均有表达，重度子痫前期组相对表达强度为1.54±1.51，对照组相对表达强度为1.15±1.01，重度子痫前期组PFNmRNA表达明显高于对照组。
2、GzmBmRNA在两组标本蜕膜组织中均有表达，重度子痫前期组相对表达强度为1.51±1.48，对照组相对表达强度为1.11士0.99，重度子痫前期组GzmBmRNA表达明显高于对照组。
结论：PEN和GzmB mRNA在重度子痫前期患者中的表达明显高于正常孕妇，提示PEN和GzmB可能参与子痫前期的发病。