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干细胞对于缺血再灌注引起的脑损伤的治疗具有较好的应用前景。许多研究报道都证明包括神经干细胞（NSC）、间充质干细胞（MSC）、内皮祖细胞（EPC）在内的干细胞对实验性的脑缺血具有明显的治疗效果。尽管大量研究表明干细胞或可通过分泌多种神经营养因子和细胞因子，促进损伤细胞的修复；或可通过分化为不同种类的细胞，修复及补充损伤的神经细胞；或可增强神经突触之间的联系，建立新的神经环路等来发挥缺血后的神经保护作用并促进神经行为学功能的修复。然而，利用干细胞治疗脑缺血仍存在诸多尚未解决的问题，如增加干细胞的存活、提供更多的证据证明长时间利用干细胞治疗的安全性问题、提供更广泛的细胞来源以解决伦理问题等。本课题主要通过NSC与小分子药物adjudin组合的方式来起到对脑缺血更好的治疗效应，即通过对NSC进行药物预刺激来提高外源性干细胞在恶劣病灶环境中的适应能力并改善内部病灶区的内环境，从而起到更好的治疗效果。 在缺血再灌注的病理过程中，炎症及氧化应激反应扮演着重要的角色，并可加剧血脑屏障的崩溃，引起神经元的大量死亡和梗死体积的扩大。Adjudin是化疗药物氯尼达明的类似物，具有吲哚酸的结构，是一种潜在的男性避孕药。在我们的前期工作中已经证明adjudin在体外由LPS诱导的BV2细胞的活化模型及脑缺血损伤的小鼠模型中均具有显著的抗炎效果，且对血脑屏障完整性具有较好的保护作用。Adjudin可在一定程度上改善缺血损伤区的内环境，而病灶区的内环境又对干细胞的存活具有重要作用，这提示我们adjudin与NSC的组合治疗可能对脑缺血损伤的治疗具有更明显的效果。 本实验中我们首先用adjudin预处理NSC24小时后，将其移植到缺血再灌注24小时后的小鼠损伤侧的纹状体部位，研究组合治疗的效果。我们结果证明与未处理的NSC组相比，adjudin预处理的NSC可通过促进脑源性生长因子（BDNF）和血管内皮生长因子(VEGF)的分泌，显著减少3天后的脑梗死体积，降低神经行为学评分，并通过抑制p38和JNK的磷酸化水平降低炎症因子如IL-6、IL1-β和TN F-α的释放及小胶质细胞的激活，同时抑制缺血再灌注引发的氧化应激反应，降低iNOS的表达，显著上调catalase和SOD2的表达。此外，我们还发现，adjudin预处理的NSC组与未处理的NSC组相比还可显著减少免疫球蛋白G和依文思蓝的渗出，并抑制血脑屏障紧密连接相关蛋白Occludin和ZO-1的降解，提示adjudin预处理的NSC对BBB的完整性具有更为显著的保护作用。由于神经干细胞的存活量的多少直接与其治疗效果相关，因而，为了进一步研究adjudin的预处理对NSC存活的影响，我们采用H2O2刺激模拟氧化应激损伤的体外模型进行研究。结果表明，adjudin预处理的NSC可显著抵抗由H2O2诱导的细胞死亡，增加Akt的磷酸化水平，通过抑制iNOS的上调和增加catalase和SOD2的表达来抑制氧化应激。同时证明adjudin的预处理在体外模型中同样可增加BDN F和VEGF的表达。 综上所述，adjudin预处理的NSC可通过增加神经营养因子的分泌增强NSC的存活能力，通过抑制p38和JNK信号通路来抑制神经炎症和氧化应激反应，并能更好的维持血脑屏障的完整性，从而起到对由缺血再灌注引起的脑损伤的更显著的保护作用。我们的研究提示adjudin在NSC移植治疗脑缺血损伤方面的潜力，为NSC与adjudin的组合应用提供了前期的实验基础。