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Ecto-F1F0-ATPaseβ是F1F0-ATPase的催化亚基，通常在细胞中主要定位于线粒体内膜，主要负责合成生物生命活动所需的大部分ATP，最近几年的研究发现，F1F0-ATPase不仅定位于线粒体内膜，在哺乳动物细胞表面同样有分布，被称为Ecto-F1 F0-ATPase，研究发现Ecto-F1F0-ATPaseβ亚基在作为细胞膜表面受体时，具有抑制细胞凋亡和诱导细胞的存活与增殖的作用。 Hemichannel位于细胞表面，由innexin基因编码，执行细胞外与细胞内的信号传递功能。在脊椎动物中，正常生理情况下hemichannel处于关闭状态，只有在外界压力、不良刺激及突变状态下，才能形成开放状态，传递细胞死亡信号。昆虫细胞与脊椎动物细胞不同，在正常生理状态下，昆虫细胞的hemichannel保持着低水平的开放状态，以维持细胞的正常生理代谢，当受到外界刺激时，其通透性会发生变化。 昆虫的先天性免疫主要包括体液免疫和细胞免疫两种。体液免疫中主要由脂肪体产生抗菌肽的信号通路Toll和IMD途径发生作用，细胞免疫主要依赖血细胞对外来抗原或异物发起吞噬、结节与包囊。而在昆虫细胞免疫过程中，我们知道寄生蜂寄生斜纹夜蛾以后，寄生蜂多分DNA病毒能够诱导寄主血细胞凋亡。实验室前期的转录组数据表明，在寄生蜂多分DNA病毒的免疫抑制下，寄主斜纹夜蛾血淋巴中F1F0 ATPase的β亚基是被调控上升的，而Spli-inx2和Spli-inx3基因被明显下调，表明两基因是与免疫相关的基因。 Ecto-F1F0-ATPaseβ编码521个氨基酸(amino acid，aa)，蛋白分子量为55.5kDa。本研究成功构建了Ecto-F1F0-ATPaseβ基因的真核表达载体pIZT/V5-His-Ecto-F1F0-ATPaseβ，并转染Hi5、Sf9、Spli221和Bm21细胞系，利用融合蛋白标签V5抗体，通过western blot对总蛋白的检测表明Ecto-F1F0-ATPaseβ基因均能在四种细胞中表达;之后建立稳定表达细胞系，对细胞膜表面蛋白进行提取，利用融合蛋白标签V5的抗体，通过western blot检测膜蛋白，以及细胞免疫荧光的实验，实验表明Ecto-F1F0-ATPaseβ基因在Hi5细胞中表达之后，能够正确定位到细胞膜表面。预测Ecto-F1F0-ATPaseβ基因和 spli-inx2、spli-inx3基因磷酸化位点，通过制备带磷酸化位点特异性抗体和V5标签抗体，在Ecto-F1F0-ATPaseβ基因在过表达的情况下检测inx2和inx3的表达情况。结果发现V5标签抗体可以检测到inx2和inx3的表达，而带磷酸化位点的特异性抗体检测不到inx2和inx3的表达，推测可能是由于在Ecto-F1F0-ATPaseβ蛋白存在的情况下，inx2和inx3相应位点发生了磷酸化等修饰，造成了V5抗体可以检测到，而带磷酸化位点的特异性抗体检测不到的现象出现。再通过dye uptake实验检测hemichannel的通透性变化，证明Ecto-F1F0-ATPaseβ亚基的异位表达对hemichannel的通透性有影响。但具体是否通过磷酸化inx2和inx3参与调控，还需要进一步实验验证。