核苷酸类似物的合成研究

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DNA测序技术是现代分子生物学研究的重要手段之一,目前广为应用的为第二代测序技术——高通量DNA合成法测序技术。合成法测序的基本原理是边合成边测序,在DNA聚合酶合成互补链时,通过不同荧光标记的核苷酸类似物所释放的荧光信号来获取待测DNA的序列信息。  合成法测序需要特殊的核苷酸类似物作为底物才能顺利完成,该类核苷通常具有可切割的荧光标记基团以及糖苷3位的末端封闭基团,这些修饰必需借助化学合成的手段实现。由于在分子生物学研究与应用领域对该类核苷酸类似物的广泛需求,发展高效的化学合成方法具有很大的应用和市场价值。  本论文以廉价的氰基乙酸乙酯、溴代乙醛缩二乙醇以及氯代乙醛作为起始原料,合成了3-O-叠氮甲基修饰的脱氧腺苷与脱氧鸟苷类似物,又以5-碘-2-脱氧尿苷、5-碘-2-脱氧胞苷作为起始原料,合成了3-O-叠氮甲基修饰的脱氧尿苷与脱氧胞苷类似物,从而发展了一条快速、高效、低成本的化学合成路线来制备合成法测序所必需的四种核苷类似物,以期用于满足DNA测序应用的需求。此外,我们对该类核苷类似物的三磷酸化反应进行了初步的尝试和探索。  
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