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目的:通过培养人视网膜Muller细胞与人视网膜微血管内皮细胞在微孔膜上的共同生长,建立体外人iBRB模型,观察建模过程中人视网膜Muller细胞对人视网膜微血管内皮细胞及ZO-1紧密连接蛋白的影响,从而对人视网膜Muller细胞在人iBRB中的作用进行研究。 方法:⑴采用改良酶消化法培养人视网膜Muller细胞,并对人视网膜Muller细胞的生长特征及免疫学特征鉴定。⑵采用改良方法培养人视网膜微血管内皮细胞,并对人视网膜微血管内皮细胞的生长特征及免疫学特征鉴定。⑶通过人视网膜Muller细胞和人视网膜微血管内皮细胞在微孔膜上的生长,建立体外iBRB模型。⑷观察iBRB建模过程中ZO-1紧密连接蛋白表达情况。⑸分析人RMGC对ZO-1紧密连接蛋白的影响。 结果:①反复提纯培养的人视网膜微血管内皮细胞成铺路石样表现,免疫组织化学显示细胞第Ⅷ因子抗体染色阳性。②培养的人视网膜Muller细胞光镜下胞体较大,胞浆丰富,免疫组织化学显示谷氨酰胺合成酶抗体荧光染色阳性。③人RMEC和人RMGC均可在膜上正常生长并形成紧密连接。在iBRB建模过程中,ZO-1的表达强度随时间延长而增加。 结论:在体外通过共同培养人视网膜Muller细胞和人视网膜微血管内皮细胞建立人iBRB模型,在建模过程中,人视网膜Muller细胞可以增强ZO-1紧密连接相关蛋白的表达,促进人视网膜微血管内皮细胞间紧密连接的成熟,从而提高了人iBRB的屏障功能。