【摘 要】
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目的:体外扩增编码新型隐球菌DHA1基因及共刺激分子B7-1基因的序列,以构建嵌合重组质粒,利用DNA免疫技术将重组质粒DNA直接肌注小鼠,观察其在小鼠体内产生的免疫应答,探索B7-
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目的:体外扩增编码新型隐球菌DHA1基因及共刺激分子B7-1基因的序列,以构建嵌合重组质粒,利用DNA免疫技术将重组质粒DNA直接肌注小鼠,观察其在小鼠体内产生的免疫应答,探索B7-1增强新型隐球菌DNA免疫的效果,以期能为新型隐球菌的DNA疫苗研制提供一定的实验基础.研究内容:包括新型隐球菌DHA1基因及B7-1基因嵌合重组质粒的构建及其DNA免疫两部分.结论:1)应用PCR技术,成功扩增出DHA1和B7-1基因,和文献上发表的序列完全相符.2)成功构建pcDNA3-B7-1-DHA1嵌合重组质粒,通过酶切鉴定和测序,证明了插入的正确性.3)pcDNA3-B7-1-DHA1质粒在小鼠肌肉细胞中成功表达相应的抗原,激发DTH反应.4)pcDNA3-B7-1-DHA1重组质粒免疫小鼠后能诱导特异的免疫应答,这种免疫力可以提供部分保护作用,减弱新型隐球菌在小鼠体内的感染程度,延长小鼠生存时间.5)B7-1可在一定程度上增强新型隐球菌的DNA免疫.
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