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目的：砷在自然界分布广泛，毒性较强，对生物体的影响也是多方面的，在生物进化的过程中，许多生物从细菌到哺乳动物都产生了对抗砷毒的生理机制。我们在前期研究中已从人抗砷细胞株中筛选出了5条可能参与抗砷作用的基因。本研究选取人抗砷细胞株中表达明显上调的3条ATP结合盒基因作为研究对象，利用RNA干扰技术，体外观察抗砷基因的沉默作用，然后通过细胞毒性实验分析目的基因阻断前后，抗砷细胞株抗砷性的改变，力求找到明确的抗砷基因。
方法：化学合成siRNA，在siPORTNeoFX转染剂的介导下转染人脐静脉内皮细胞ECV-304细胞，用半定量RT-PCR，real time PCR和Western-blot方法检测目的基因mRNA和蛋白水平的改变，然后通过MTT实验分析小分子干扰RNA阻断目的基因后，抗砷细胞株抗砷性的改变．
结果： (1)ABCAl体外合成的3条siRNA通过siPORTNeoFX转染剂转染人脐静脉内皮细胞ECV-304细胞后，均能不同程度地抑制目的基因的表达。转染后48h的real time PCR检测显示siRNA-1，siRNA-2和siRNA-3组的目的基因的表达抑制率分别为32.08％±0.746％、55.08％±0.075％、87.09％±0.031％，与阴性对照组比较均有显著性差异(p<0.05)。其中，siRNA-3的抑制作用最强。而阴性对照siRNA组与未转染抗砷细胞组比较，ABCA1 mRNA表达无明显减低(p>0.05)．Western-blot方法检测蛋白改变结果与PCR检测相互一致。噻唑兰法(MTT)进行48h NaAsO2毒性试验后，实验组细胞对急性砷染毒表现出耐受性降低，siRNA-3组在各浓度下生存率都明显低于同步对照组。实验组LC50为8.05 μM，对照组LC50为11.09 μM。
(2)ABCE1体外合成的2条siRNA通过siPORTNeoFX转染剂转染人脐静脉内皮细胞ECV-304细胞后，均能不同程度地抑制目的基因的表达。转染后48h的real time PCR检测显示siRNA-1，siRNA-2的目的基因的表达抑制率分别为46.6％±0.339％、73.8％±0.545％，与阴性对照组比较均有显著性差异(p<0.05)。其中，siRNA-2的抑制作用较强。而阴性对照siRNA组与未转染抗砷细胞组比较，ABCE1mRNA表达无明显减低(p>0.05).Western-blot方法检测蛋白改变结果与PCR检测相互一致。噻唑兰法(MTT)进行48h NaAsO2毒性试验后，实验组细胞对急性砷染毒仍表现出较强的耐受性。
(3)ABCF1体外合成的3条siRNA通过siPORTNeoFX转染剂转染人脐静脉内皮细胞ECV-304细胞后，均能不同程度地抑制目的基因的表达。转染后48h的real time PCR检测显示siRNA-1，siRNA-2和siRNA-3组的目的基因的表达抑制率分别为76.73％±0.768％、65.39％±0.699％、52.16％±0.014％，与阴性对照组比较均有显著性差异(p<0.05)。其中，siRNA-1的抑制作用最强。而阴性对照siRNA组与未转染抗砷细胞组比较，ABCF1 mRNA表达无明显减低(p>0.05)．Western-blot方法检测蛋白改变结果与PCR检测相互一致。噻唑兰法(MTT)进行48h NaAsO2毒性试验后，实验组细胞对急性砷染毒仍表现出较强的耐受性。
结论：siRNA可特异性的抑制目的基因的表达，ABCA1基因被有效干扰后，使细胞对急性砷染毒表现出耐受性降低；抑制ABCE1和ABCF1，细胞仍表现出对急性砷染毒的耐受性，从而初步明确ABCA1基因可能是关键的抗砷基因，而ABCE1与抗砷作用相关，ABCF1对抗砷细胞的抗砷性影响不大。