论文部分内容阅读
黄芪是一味常用中药,主要分布于我国北部和西北地区。《中国药典》(2005年版)收载的中药黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,春、秋二季采挖,除去须根及根头,晒干。
黄芪具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功效。临床用于气虚乏力、食少便溏、中气下陷、久泻脱肛、便血崩漏、表虚自汗、气虚水肿、痈疽难溃、久溃不敛、血虚痿黄、内热消渴,慢性肾炎、蛋白尿和糖尿病等。
文献报道黄芪主要含有皂苷、黄酮和多糖类成分,另外尚含有氨基酸、蛋白质、核黄素、有机酸和甾醇等成分。现代药理研究表明黄芪具有免疫调节、抗氧化、抗衰老作用;具有保护心功能、增强心肌收缩性能、增加冠脉血流量、降低心肌耗氧量和抗心律失常作用;黄芪还有抗糖尿病等作用。其药理活性物质基础为皂苷类、黄酮类和多糖类成分。我们对黄芪药理实验研究结果表明富含黄酮成分部位具有抗应激、抗炎活性。
但《中华人民共和国药典》(2005年版)收载的黄芪质量控制方法仅是采用HPLC-ELSD法测定黄芪皂苷Ⅳ(黄芪甲苷,astragalosideⅣ)的含量。
鉴于中医临床用药注重整体的观念,而且中药材所含成分复杂,其药效可能是各成分的综合作用,因此仅用某一个成分作为指标,来衡量该药材的质量,不能体现其内在本质。所以在建立有效成分或专属性成分或指标性成分含量测定的基础上,探讨多成分综合评价体系是非常必要的。本论文研究主要内容为(1)分离并鉴定用于黄芪定量的对照品;(2)增加黄芪药材中有效成分或指标性成分黄酮的含量测定方法;(3)优化黄芪甲苷含量测定方法;(4)建立黄芪药材中黄酮类化合物的指纹图谱标准。
主要研究结果如下:
1.本论文对黄芪化学成分进行了研究,利用溶剂法以及多种色谱法对黄芪乙酸乙酯部分和正丁醇部分的主要化学成分进行了研究,从中分离得到9个化合物。用UV、MS、1D及2DNMR方法鉴定了结构,其中有6个黄酮类成分,分别为毛蕊异黄酮苷(W1)、5-羟基毛蕊异黄酮苷(W1)、芒柄花苷(W2)、毛蕊异黄酮(W4)、芒柄花素(W3)、5-羟基毛蕊异黄酮(W6);1个皂苷类成分,即黄芪甲苷(W10);2个甾类成分,即胡萝卜苷(W7)和β-谷甾醇(W8)。研究结果为建立黄芪的质量标准提供了对照品,根据黄芪中主要的活性或标志性成分,确定W1~W4及W10为定量用对照品。
2.首次从黄芪中分离得到5-羟基毛蕊异黄酮。
3.首次发现并讨论了3-OH,4-OCH3异黄酮的1HNMR图谱中的溶剂效应问题,并对毛蕊异黄酮苷及毛蕊异黄酮的核磁共振数据进行了正确归属。
4.为检测药材中的黄芪甲苷等皂苷的真正含量,明确提出测定黄芪甲苷含量时不宜采用加碱的建议。
5.采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-DAD)建立了黄芪中4个黄酮类化合物(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)的含量测定方法,并测定了13批黄芪药材中4个黄酮类化合物的含量,规定了黄芪中以上4个化合物的含量标准范围。
6.采用高效液相色谱和对皂苷灵敏度高的蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)建立了黄芪甲苷的含量测定方法,测定了13批黄芪药材中黄芪甲苷的含量,规定了黄芪中黄芪甲苷的含量标准范围。
7.采用高效液相色谱法建立了黄芪中黄酮类化合物的指纹图谱,指认了18个共有峰,标定了5个指纹峰的结构。
该研究结果为新版《中华人民共和国药典》建立规范的黄芪中药材质量标准以及临床用药提供了科学依据。