【摘 要】
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通过纯品hCG抗原免疫Balb/c小鼠,经细胞融俣、克隆筛选之后得到了分泌抗α-hCG 抗体的细胞株2G2-6E7-2G2和分必抗β-hCG抗体细胞株7H3-4F5-2H10.都具有很高的抗体分 泌能力,
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通过纯品hCG抗原免疫Balb/c小鼠,经细胞融俣、克隆筛选之后得到了分泌抗α-hCG 抗体的细胞株2G2-6E7-2G2和分必抗β-hCG抗体细胞株7H3-4F5-2H10.都具有很高的抗体分 泌能力,腹水中抗体浓度为10mg/ml左右,效价达10<9>,亲和常数接近6×10<9>;并建立了一套有效的抗体纯化流程:40﹪SAS沉淀结合亲和层析的方法.在此基础上用所得抗体对 "间接法ELISA体系"和"夹心法ELISA体系"中几个重要的影响因素进行了比较、研究.确定了间接法包被条件为CB缓冲液(0.05M pH9.6)、37℃、国产hCG1.25IU/孔;封闭物为1﹪BSA;surfactant为0.05﹪TWEEN-20.在夹心法的基础上,研究人员结合了LAB测定法,包被 条件选取了PB缓冲液(0.02M pH7.4)、37℃、1:1,000抗体A;生物素-抗体B耦联物1:2,000;封闭物及surfacant同间接法.从而建立两套稳定、有效的ELISA抗体/抗原检测体系.其中对不同surfactant及其不同浓度下的作用效果,不同封闭物的作用效果做了比较分析.该文所获得的单抗细胞株为将来有关激素检测、激素本身相关研究、及疫苗研究等领域打下了基础.
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