【摘 要】
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目的：研究槲皮素(Que)对培养的乳鼠心脏成纤维细胞的纤维连接蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响，探讨其在心肌肥厚中可能的作用机制。方法：1．细胞分离培养和鉴定：用胰酶消化法分离细胞，差速贴壁分离法获得心肌成纤维细胞，光镜和免疫组化的方法鉴定细胞。2．细胞增殖检测：WST法测定细胞增殖，免疫组化方法测定心肌成纤维细胞FN及TGF-β1的表达。3．实验分组：根据不同的药物及药物
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目的：研究槲皮素(Que)对培养的乳鼠心脏成纤维细胞的纤维连接蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响，探讨其在心肌肥厚中可能的作用机制。
方法：1．细胞分离培养和鉴定：用胰酶消化法分离细胞，差速贴壁分离法获得心肌成纤维细胞，光镜和免疫组化的方法鉴定细胞。2．细胞增殖检测：WST法测定细胞增殖，免疫组化方法测定心肌成纤维细胞FN及TGF-β1的表达。3．实验分组：根据不同的药物及药物不同浓度，实验共分二大部分，第一部分：观察Que对心肌成纤维细胞的影响，主要分两个步骤：首先观察Que对基础状态下心肌成纤维细胞增殖是否有影响，设不同浓度的Que(10-6-10-4M)组和空白对照组。第二步观察Que对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下心肌成纤维细胞增殖的影响，设空白对照组、AngⅡ组和不同浓度的Que(10-6-10-4M)+Ang Ⅱ组。以WST法检测心肌成纤维细胞增殖情况。第二部分，观察Que对FN和TGF-β1表达的影响，主要分两个步骤：首先观察Que对基础状态下心肌成纤维细胞FN、TGF-β1表达的影响，设不同浓度的Que(10-6-10-4M)组和空白对照组。第二步观察Que对Ang Ⅱ刺激下FN、TGF-β1表达的影响，设空白对照组、Ang Ⅱ组和不同浓度的Que(10-6-10-4M)+Ang Ⅱ组。以免疫组化方法测定心肌成纤维细胞FN和TGF-β1的表达。
结果：1．培养的细胞经过光镜和免疫组化的方法鉴定证实为心肌成纤维细胞。2．Que对心肌成纤维细胞增殖和FN、TGF-β1表达的影响：①Que对基础状态下的成纤维细胞增殖无明显影响，Que各浓度组(10-6-10-4M)与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。②Que呈浓度依赖性的抑制AngⅡ的促增殖作用。Que各浓度组OD值明显低于AngⅡ组(P<0.01)。③Que在基础状态下能抑制FN、TGF-β1的表达，Que各浓度组(10-6-10-4M)FN、TGF-β1均低于空白对照组(P<0.01)。④Que呈浓度依赖性的抑制Ang Ⅱ刺激下的FN、TGF-β1的表达。Que各浓度组(10-6-10-4M)FN、TGF-β1表达减少，与Ang Ⅱ组比较差异有统计学意义(P<0.01)。
结论：1.Que呈浓度依赖性的抑制Ang Ⅱ介导的心肌成纤维细胞增殖。2.Que呈浓度依赖性的抑制基础状态及AngⅡ介导的FN、TGF-β1的表达。
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