盐酸青藤碱增加肿瘤细胞放射敏感性的机制研究

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[目的]:  盐酸青藤碱在人宫颈癌(Hela)细胞和人肺腺癌(A549)细胞中放疗增敏的现象研究及具体机制研究。  [方法]:  本课题首先利用人脐静脉内皮细胞(Huvec)和人肺正常上皮细胞(Beas-2B)等正常细胞在与Hela和A549癌细胞的对照下,用MTT实验筛选出其安全浓度。在体外以Hela和A549细胞系为实验对象,分为四组:阴性对照组、加药组(1 ummol/l)、照射组(IR)、加药联合照射组。用MTT和克隆形成实验观察联合照射组是否更加有效的抑制肿瘤细胞的增殖;用流式细胞分析仪(FCM)检测细胞凋亡情况;用免疫荧光实验分析rH2AX在细胞中的表达;用Western-blot实验进一步探讨其放疗增敏的具体机制,主要检测DNA放射损失修复相关蛋白(ATM p-ATM p-BRCA1 Ku80 Rad51 rH2AX)。  [结果]:  1.盐酸青藤碱抑制Hela和A549细胞的增殖。  2.盐酸藤碱抑制Hela和A549细胞克隆形成率。  3.盐酸青藤碱增加肿瘤细胞凋亡  4.盐酸青藤碱增加细胞核内的rH2AX聚集点。  5.盐酸青藤碱可抑制DNA放射损伤修复过程  [结论]:  盐酸青藤碱可在不损伤脐静脉内皮细胞(Huvec)和肺正常上皮细胞(Beas-2B)的前提下,达到对Hela和A549细胞的放疗增敏。其产生放疗增敏现象的机制与其增加肿瘤细胞的凋亡和抑制DNA放射损失修复因子表达有关。
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