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目的:优选小枝玫瑰总黄酮的最佳提取工艺。测定维药小枝玫瑰花中没食子酸、槲皮素、木犀草素的含量。观察小枝玫瑰提取物对Ⅰ型糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响。观察其在降低高血糖、高血脂等方面的作用,以期为小枝玫瑰综合利用和产品开发提供参考。 方法:1在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察体积分数、料液比、提取时间3个因素对提取的影响,优选小枝玫瑰总黄酮最佳提取工艺。2采用反相高效液相色谱法测定没食子酸、槲皮素、木犀草素的含量,色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相分别为:甲醇-0.3%磷酸(6∶94)、甲醇-0.2%磷酸(63∶37)、甲醇-0.2%磷酸(50∶50);检测波长分别:为272nm、370nm、350nm;3通过急性毒性实验研究,测定小枝玫瑰的最大耐受量MTD,两周内每天观察并记录小鼠体征变化及生理反应。4通过采用链脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠,血糖试纸法测定血糖,观察小枝玫瑰提取物对糖尿病小鼠(Ⅰ、Ⅱ型)血糖的影响,同时进行葡萄糖耐量实验(OGTT),观察玫瑰提取物对糖尿病小鼠糖耐量的改善作用。5通过喂养高脂饲料建立高脂血症大鼠模型,确定小枝玫瑰提取物对实验性高血脂大鼠的降血脂作用。 结果:1.得到小枝玫瑰总黄酮最佳提取工艺条件为A2B3C1,即用50%的乙醇,以1∶16的料液比加热回流30min。小枝玫瑰总黄酮提取量平均值为66.60mg/g。2.没食子酸质量浓度在5.05~101μg/ml范围内峰面积线性关系良好(r=0.9999)回归方程为:Y=32582.34X+16156.67,平均回收率为100.15%,RSD为1.39%,小枝玫瑰花中没食子酸含量为4.9173mg/g;槲皮素进样量在0.0804~0.402μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为:Y=541.62X-1.146,r=0.9999,平均回收率为99.70%,RSD为1.27%,小枝玫瑰花中槲皮素含量为0.2598mg/g;木犀草素在进样量0.1632~0.816μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为:Y=7090981.62X-37746.20,r=0.9999,平均回收率为101.45%,RSD为1.71%,小枝玫瑰花中木犀草素含量为0.0884mg/g;3.小鼠急性毒性实验测出小枝玫瑰醇提物的最大耐受量MTD为3.12g(生药)/kg。4.各组小枝玫瑰提取物均能降低糖尿病小鼠血糖含量,且呈一定量效关系,醇提物和水提物均以大剂量效果为好,在所有提取物中以醇提物大剂量效果最好,但效果不及阳性对照药物盐酸二甲双胍组。小枝玫瑰提取物均能改善其糖耐量。5.通过建立高血脂模型,确定小枝玫瑰醇提物高、中、低剂量组组(686.32 mg/kg、343.16 mg/kg、171.56mg/kg)均可使大鼠血清中TC、TG、LDL-C水平下降,HDL-C水平显著性升高,具有降血脂作用。 结论:1.本课题首次对维吾尔特色药材小枝玫瑰玫瑰花中总黄酮提取工艺进行优选,得到了最优的提取工艺。2.高效液相色谱法方法简便,准确,重复性好,可用测定小枝玫瑰花中没食子酸、槲皮素、木犀草素的含量。3.小枝玫瑰提取物可以降低糖尿病小鼠血糖含量,对糖尿病小鼠糖耐量有改善作用,可用于临床治疗糖尿病。4.整体药效学实验表明该药材可在降血糖、降血脂、等方面进行深入研究,指导临床开发和应用。