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脂肽是由微生物产生的次级代谢产物,具有良好的表面活性和特殊的生物活性,以及低毒、可生物降解、环境友好性等优点,使其在食品、化妆品、医药、农业和环境等领域具有潜在的应用前景。
采用薄层色谱法(TLC)从油田水中分离的49菌株中初步筛选出11株脂肽产生菌,然后利用毛细管上升法、排油圈法及液滴塌陷法进行复筛,选出2株高产脂肽产生菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌,采用红外光谱法(IR)和电喷雾质谱法(ESI-MS)分析两株菌产生的生物表面活性剂,结果表明都为surfactin。
利用单次单因素法、响应面设计法和正交设计法,以生物量、产物酸沉淀量和发酵液的表面张力为评价参数,分别对Bacillus subtilis FO252和Bacillus subtilis TD7产脂肽的培养条件进行优化,在最佳培养基中培养,Bacillus subtilis FO252和Bacillus subtilisTD7产脂肽的产量分别达到2.5 g/L和6.5 g/L。
Bacillus subtilis TD7在20种分别加有不同氨基酸的培养基中培养,利用电喷雾质谱法(ESI-MS)和气质联用(GC/MS)分析该菌株在不同培养基中产生的脂肽的类型和组成,结果表明该菌在不同培养基中产生的脂肽都为surfactin,当在培养基中加入Arg,Gln或Val能显著提高含有偶数个碳的β-羟基脂肪酸的surfactin(即surfactin C14和surfactinC16)的含量,而加入Cys,His,Ile,Leu,Met,Ser或Thr则显著提高含有奇数个碳的β-羟基脂肪酸的surfactin(即surfactin C13,surfactin C15和surfactin C17)的含量。通过在培养基中添加不同的氨基酸来提高目标化合物的产量,对实验室和工业上快速有效的得到所需要的目标surfactin具有指导意义。