论文部分内容阅读
抗生素对照品是抗生素药物质量分析的基础,抗生素对照品量值确定与传递方法的标准化研究是全面提高抗生素对照品质量的根本途径.抗生素对照品准确含量的确定,是对照品建立或标化的中心任务.尽管根据WHO的指导原则,已经确立了较为完备的量值溯源-传递体系,但由于化学量值传递链的脆弱性,传递过程中极有可能造成难以弥补的偏差.在头孢替唑对照品的标化中,即发现不同来源的头孢替唑对照品存在较大差异,出现量值混乱,提示极应建立抗生素对照品偏差验证措施.该章以对头孢替唑含量偏差纠正、一类新药卡德沙星对照品建立和十六元大环内酯类抗生素多组分含量分析为例,讨论了抗生素对照品量值确定中多种分析方法互相补充的重要性,以及各种测定方法的优点和局限性,并据此提出了抗生素对照品偏差验证的一般策略.不确定度评定是国际上所有涉及测量的技术领域评价测量结果的通行方法.该文在抗生素对照品中首次引入不确定度概念,使其量值表述更为科学,并同国际惯例接轨.以卡德沙星首批对照品及卡德沙星原料为例,分别讨论采用不同方法确定抗生素含量的不确定度,并模拟抗生素对照品传代标化实验,探讨抗生素对照品量值溯源-传递体系不确定度的来源与传播规律.该文实验表明,首批对照品的不确定度将在对照品量值传递链中持续传播,而传代操作将引入新的不确定度.整体上,对照品量值不确定度呈现逐代递增趋势.同时证明,采用不确定度小的其他量值溯源途径实验方法,对经过多次传代标化的量值进行验证是获得可靠结果的必要措施.ISO要求用于对照品研制和量值传递的所有方法均应经过充分的研究和验证.该文系统探讨了蒸发光检测器(ELSD)在抗生素对照品量值确定中的应用,通过模拟实验考察了ELSD响应值随流动相组成改变的变化规律;通过氨基糖甙类、β-内酰胺类、喹诺酮类以及十六元大环内酯等四大类19种抗生素在ELSD中的实际应用,证明了线性较好的ELSD峰面积与进样量直线方程(R2>0.999)以及相对较宽的线性范围普遍存在于各类抗生素中;同时,讨论了不同进样量的抗生素物质在ELSD中响应规律;探讨了不同抗生素在ELSD中响应的异同,并对差异进行分析和实验确证;推导了斜率校正计算法用于ELSD的合理意义.为ELSD在抗生素对照品量值确定与验证中的合理应用提供了参考和推荐意见.该文另对新型抗生素抗菌肽进行了一定的前瞻性研究,为获取研究用的抗菌肽,构建了表达抗菌肽的E.Coli工程菌株,并进行了高效诱导表达、融合蛋白分离纯化及酶切等实验条件筛选,制备了抗菌肽多克隆抗体,为后继研究作准备.