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香蕉(Musa spp.)是世界上第四大粮食作物,也是广东省栽培最大宗的一种水果。但是,香蕉枯萎病[Fusarium oxysporum f.sp.cubense(FOC)]的发生和蔓延严重威胁了香蕉的生产。生物防治是一种很有前景的防治途径,但单一有效微生物易于受到环境中生物和非生物因素的影响,导致降低或失去防效,因此筛选具有协同作用的微生物组合和开发复合的微生物杀菌剂对香蕉枯萎病的防治将具有重要的意义。
本研究以香蕉枯萎病菌4号小种为靶标,首先从香蕉根际土壤中分离和筛选有拮抗作用的真菌、细菌和放线菌菌株;然后通过平板抑菌圈法测定候选拮抗菌相互间抑制作用,以筛选出相互间不抑制或抑制性弱的的微生物组合,继而进行温室盆栽防效测定,并对防治效果较好的微生物组合进行了菌株种类鉴定。主要结果如下:
1.对采集于广州天河区、广州番禺区、中山和东莞等地的50个香蕉根际土壤样品进行了微生物分离,共获得真菌368株、细菌1694株和放线菌112株;用平板对峙培养法对所分离菌株进行了拮抗作用测定,获得具有拮抗作用的真菌129株、细菌122株、放线菌33株。
2.通过平板抑菌圈法对不同类的拮抗菌株进行了亲和性测定,获得相互间不抑制或抑制性弱的微生物组合(真菌、细菌和放线菌)13个。
3.对室内筛选出的13个微生物组合进行了温室盆栽防治效果测定,结果表明盆栽防治效果较好的微生物组合为真菌Agl+细菌09+放线菌t47,将该组合菌液混入自然土,并对待种香蕉苗进行浸根,其种植后10d再实施香蕉枯萎病菌4号小种孢子悬浮液灌根接种的防效达到75.00%。
4.生防微生物对香蕉枯萎病的生防机制的初步研究表明:真菌.Agl菌株对香蕉枯萎病菌的作用主要表现为营养和空间的竞争;本试验未发现明显的重寄生作用,只在光学显微镜下发现菌丝生长往往缠绕于病原菌菌丝上。细菌O9和放线菌t47菌株对香蕉枯萎病菌有明显的抑菌带,对峙培养5d后菌丝逐渐稀疏、干枯。真菌Ag1、细菌O9和放线菌t47的发酵滤液对香蕉枯萎病菌有一定的抑制作用,抑制率分别达到21.34%、23.36%和65.17%。
5.通过形态学和分子生物学相结合的方法,对有效微生物组合的菌株Ag1、O9和t47进行菌株种类鉴定,其真菌菌株Ag1为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),细菌菌株O9为.Bacillus poly向qnenticus,放线菌菌株t47可能是Streptomyces puniceus的近缘种。