论文部分内容阅读
目的：考察红松松塔(pinecone of Pinus koraiensis Sied.et Zucc，以下简称PC)提取物的成分及相关生物学活性。
方法：
(1)使用气质联用技术(GC-MS)对红松松塔提取物进行挥发性成分分析。
(2)选取腺病毒3型(Adenovirus 3，ADV3)和柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3，CVB3)为实验对象，采用体外细胞培养技术，对HeLa细胞进行多层次给药，通过观察细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)结合MTT比色法考察PC提取物的抗ADV3和CVB3的作用效果及机制，并用治疗指数(therapeutic index，TI)来评价样品的治疗效果。
(3)选取人胃癌细胞系MGC—803细胞和SGC—7901细胞为研究对象；采用体外给药法将PC直接作用于细胞，分别培养24、48、72h后用MTT法测定PC对肿瘤细胞的抑制率。
结果：
(1)通过GC—MS，在红松松塔环已烷提取部位(部位IV)中鉴定出21种化合物，分别为单萜(96.29％)、倍半萜(1.9％)和烯醇(0.41％)类化合物；在红松松塔石油醚提取部位(部位I)中鉴定出36种化合物，分别为单萜(22.28％)、二萜(61.42％)和倍半萜(16.3％)类化合物；在红松松塔乙酸乙酯提取部位(部位II)中鉴定出28种化合物，分别为单萜(13.45％)、二萜(66.4％)和倍半萜(20.15％)类化合物。
(2)在抗ADV3实验中，红松松塔乙醇总提取物(部位P)、部位I和部位II具有对ADV3的吸附作用，其IC50分别为35.65μg/ml、43.54μg/ml、27.31μg/ml，T1分别为1.72、1.56、9.02；部位II能抑制ADV3复制增殖，其IC50为73.55μg/ml，TI为3.35；部位P及I、II、红松松塔甲醇提取部位(部位III)和IV均能阻断ADV3侵入细胞，其IC50分别为55.69μg/ml、42.34μg/ml、77.52μg/ml、61.06μg/ml、67.86μg/ml，T1分别为1.10、1.60、3.18、1.73、0.87。
(3)在抗CVB3实验中，部位P及部位I和II具有对CVB3的吸附作用，其IC50分别为19.17μg/ml、9.12μg/ml、35.09μg/ml，T1分别为3.21、7.45、7.02；PC各提取部位均能直接灭活CVB3，部位P及I、II、III和IV的IC50分别为129.18μg/ml、63.58μg/ml、104.32μg/ml、64.27μg/ml、58.71μg/ml，相应的T1分别为0.48、1.07、2.36、1.64、1.01；PC各提取部位同时具有阻断CVB3侵入HeLa细胞的作用，IC50分别为55.69μg/ml、42.34μg/ml、77.52μg/ml、61.06μg/ml、67.86μg/ml，T1分别为1.10、1.60、3.18、1.73、0.87。
(4)PC各提取部位(部位IV除外)作用于人胃癌细胞系MGC—803细胞后，其存活率大为降低，且存活率与浓度成反相关，即PC各提取部位的肿瘤抑制率与浓度成正相关：随着药物作用时间的延长，PC各提取部位(部位IV除外)的肿瘤抑制率逐渐增加；各提取部位中，部位III活性最强，部位II次之。
(5)当人胃癌细胞系SGC—7901细胞与PC各提取部位共育后，其存活率大为降低，且存活率与浓度成反相关，即PC各提取部位的肿瘤抑制率与浓度成正相关；随着作用时间的延长，药物作用效果均减弱；在PC各提取部位中，部位II的活性最强。
结论：
(1)通过GC—MS，已初步鉴定出了红松松塔中的挥发性物质及其含量。
(2)PC提取物能有效抑制ADV3和CVB3。(3)PC提取物能有效抑制人胃癌细胞系MGC—803和SGC—7901细胞。