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本项研究对课题组保存的16株乳酸菌进行体外产维生素B12的筛选,研究在不同条件下产维生素B12的能力,同时对产维生素B12乳酸菌进行温度、耐胆盐、酸、人工胃液和肠液试验。结果表明:16株菌中有8株产维生素B12,其中3株产维生素B12的量较高,产维生素B12的量最高的SE7-1菌株被鉴定为干酪乳杆菌鼠李糖亚种、SE5-1菌株被鉴定为嗜酸乳杆菌、SE1-3被鉴定为粪肠球菌。对产维生素B12的3株菌进行了耐胆盐和耐酸性试验,结果3株菌均有一定的胆盐和酸耐受性。在pH 2的培养基中生长均受到抑制,随着时间的延长抑制作用更加明显,在pH 3的培养基中有较高的耐受性,当pH值达到5时几乎不受抑制。3株菌在胆盐浓度为0.3%时均受到的抑制,抑制作用与对照相比差异较显著,在胆盐浓度为0.2%的培养基中,菌株的生长受到抑制,但抑制作用不明显。SE7-1对胆盐和酸的耐受性较其它2株菌均高,SE5-1的耐受性稍强于SE1-3。研究了温度、pH、时间、接种量对乳酸菌产维生素B12的影响,结果表明因菌株的不同影响程度有一定的差异性。对SE7-1产维生素B12的影响程度分别为D﹥A﹥C﹥B,即pH﹥培养温度﹥培养时间﹥接种量,产维生素B12的最大组合为A3B3C4D4,在此条件下产维生素B12的量可达到90.9862mg/L。对SE5-1产维生素B12的影响程度分别为D﹥B﹥A﹥C,即pH﹥接种量﹥培养温度﹥培养时间,产维生素B12的最大组合为A3B3C4D4,在此条件下产维生素B12的量可达到28.5246mg/L。对SE1-3产维生素B12的影响程度分别为D﹥A﹥C﹥B,即pH﹥培养温度﹥培养时间﹥接种量,产维生素B12的最大组合为A3B2C4D3,在此条件下产维生素B12的量可达到58.4528mg/L。