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研究目的:
通过对骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromes，MDS)患者Mitoferrin-1、Mitoferrin-2和ABCB10在基因水平和蛋白水平的表达研究，揭示MDS患者线粒体铁超载的原因，探讨线粒体铁代谢异常在MDS发病中的作用，为祛铁治疗MDS提供依据。
研究对象和方法:
1.选择MDS初诊患者（成人23例和儿童8例）为实验组，免疫性血小板减少症(ITP)初诊患者（成人12例和儿童8例）为本实验的近似健康对照组。实验组入选标准参照WHO(2008)MDS诊断分型，且要求未行输注红细胞和祛铁治疗;实验组和对照组均排除其它血液系统疾病、严重感染、甲状腺功能亢进等铁代谢异常的疾病。
2.用无菌注射器分别抽取实验组和对照组的骨髓液，迅速涂片数张，后再抽取骨髓液各2-4ml，并迅速打入EDTA抗凝管中。
3.分别抽取实验组和对照组清晨空腹静脉血各3ml，肝素抗凝，送至我院生化室检测血清铁代谢指标。
4.分别对实验组和对照组骨髓细胞涂片行铁染色，光学显微镜下观察骨髓细胞外铁、内铁的分布，记录并采集图像保存。
5.应用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞，并分装2管分别用于总RNA和蛋白的提取，于-80℃保存。
6.参照Trizol试剂说明书提取骨髓单个核细胞中总RNA，检测RNA的纯度及完整性;应用Fermentas第一链反转录试剂盒合成cDNA;采用Real-timePCR测定Mitoferrin-1mRNA、Mitoferrin-2mRNA和ABCB10mRNA的表达。
7.使用RIPA裂解液提取骨髓单个核细胞中总蛋白，应用WesternBlot分别测定Mitoferrin-1、Mitoferrin-2和ABCB10蛋白的表达。
结果:
1.成人MDS患者Mitoferrin-1mRNA、Mitoferrin-2mRNA和ABCB10mRNA的表达与对照组比较均无明显统计学差异(P＞0.05)。
2.(1)成人低危组即MDS-RA、MDS-RARS患者Mitoferrin-1蛋白的表达高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.001);(2)高危组RAEB患者Mitoferrin-1蛋白的表达与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）;(3)RARS患者Mitoferrin-1蛋白的表达高于RA，差异有统计学意义(P＜0.001)(4)MDS患者Mitoferrin-2蛋白的表达与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05);(5)低危组ABCB10蛋白的表达高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.001);(6)高危组ABCB10蛋白的表达与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05);(7)RARS患者ABCB10蛋白的表达高于RA，差异有统计学意义(P＜0.001)。
3.MDS患儿Mitoferrin-1mRNA、Mitoferrin-2mRNA和ABCB10mRNA的表达与对照组比较均无明显统计学差异(P＞0.05)。
4.(1)2例RA患儿Mitoferrin-1蛋白的表达均高于对照组;(2)RAEB患儿Mitoferrin-1蛋白的表达与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05);(3)MDS患儿Mitoferrin-2蛋白的表达与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05);(4)2例RA患儿ABCB10蛋白的表达均高于对照组;(5)RAEB患儿ABCB10蛋白的表达与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论:
1.MDS患者Mitoferrin-1和ABCB10在基因水平上的表达较对照均无明显增高，但在蛋白水平上的表达呈现出异质性，低危组（RA、RARS）表达高于对照组，高危组(RAEB)与对照组相比无明显增高。
2.MDS患者Mitoferrin-2在基因和蛋白水平上的表达较对照均无明显增高。
3.MDS患者Mitoferrin-1的表达可能受转录后的调节，在ABCB10介导下不适当的稳定性的增加可能参与了部分MDS（尤其是RARS）患者线粒体铁超载的发生。
4.Mitoferrin-2可能与MDS线粒体铁超载的发生无关。