La3+、Ce4+及其壳寡糖配合物对刺参生长、非特异性免疫和抗病力的影响

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:MaoZeDongNiMaBi2005
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近年,刺参快速扩大化和集约化的养殖导致了刺参感染性疾病爆发,然而抗生素的使用会带来刺参抗药性、药物残留、污染环境等问题。本论文探究了La3+、Ce4+及其壳寡糖配合物对刺参生长和免疫的潜在作用。主要研究内容如下:1.在基础饲料(粗蛋白18.6%,粗脂肪1.1%)中添加La(NO3)3,分别制成含有0、10、25、50和75 mg/kgLa3+的饲料,然后饲喂初始体重为6.72±0.01 g的刺参8周,研究La(NO3)3对刺参生长、免疫和抗病力的影响。试验分5个处理组,每组设4个重复,每天17:00饱食投喂一次,次日8:00清理残饵粪便,试验期间保持海水温度16±0.5℃,pH 7.8-8.2,盐度30-31‰,溶氧≥5mg/L,氨氮≤0.5 mg/L,亚硝态氮≤1 mg/L。研究结果表明随着饲料中La3+含量从0增加到50 mg/kg,刺参的特定生长率(SGR)从0.9增加到1.24%/d(P<0.05),但是随着La3+含量继续增加SGR下降到0.99%/d。刺参体腔液的吞噬活性和呼吸爆发活性的结果与刺参SGR呈现相同的趋势(P<0.05)。在La3+添加量为50mg/kg时,刺参体腔液细胞的超氧化物歧化酶(T-SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)均达到最高(P<0.05)。同时攻毒试验结果也表明,刺参在注射灿烂弧菌后,50 mg/kgLa3+组的刺参累计发病率最低(36.54%)(P<0.05)。因此,刺参饲料中添加50 mg/kgLa3+,能够显著提高刺参的生长和抗病能力。2.利用镧(La)可以和壳寡糖配位,制备La3+含量为8.82%的壳寡糖镧配合物(COS-La)。按照饲料配方制备含有0、150、300、600和1200 mg/kg COS-La的实验饲料,饲喂6.72±0.01g的刺参8周后,测定生长、免疫和抗病力等指标。研究结果表明添加300和600 mg/kg COS-La可以显著促进刺参生长(0.9-1.2 %/d)(P<0.05),但是更高剂量的COS-La对刺参生长起到抑制作用(0.88%/d)。300和600 mg/kg COS-La组刺参体腔液的吞噬活性和呼吸爆发活性也显著高于其它组(P<0.05)。体腔液细胞的T-SOD、ACP和AKP活性均在600 mg/kg COS-La时达到最高(P<0.05),在300 mg/kg时,免疫酶活性也显著高于空白组(P<0.05)。攻毒试验结果,300和600 mg/kg组刺参累计发病率显著低于其它各组(41.03%,38.46%)(P<0.05)。对比第一章结果,300 mg/kg COS-La中La3+的含量为26.46mg/kg,300 mg/kg COS-La组的ACP和AKP活性均高于25 mg/kg La3+组,同时300 mg/kg COS-La组的累计发病率(41.03%)低于25 mg/kg La3+组(53.85%)。这表明当La3+含量相同时,COS-La对刺参免疫刺激效果优于单纯的La(NO3)3,这可能是COS-La中的壳寡糖起到了一定的协同作用。3.实验饲料中添加(NH4)2Ce(NO3)6分别制成含有0、10、25、50和75 mg/kgCe4+的饲料,然后饲喂6.72±0.01g的刺参8周,测定生长、免疫和抗病力等指标。研究结果表明添加50 mg/kg Ce4+显著提高了刺参特定生长率(0.9-1.2%/d)(P<0.05)。刺参体腔液的吞噬活性、呼吸爆发活性、ACP和AKP活性均在75mg/kg时达到最高(P<0.05),但是刺参体腔液细胞的T-SOD和T-NOS活性没有显著性差异(P>0.05)。攻毒试验表明,在25和50 mg/kgCe4+时,刺参累计发病率低于其它处理组,但是没有显著性差异(P>0.05),75 mg/kgCe4+组的累计发病率有升高趋势。因此,饲料中添加Ce4+能够促进刺参生长,提高刺参体腔液免疫酶活性,但是对刺参抗病力作用不明显。4.利用铈(Ce)可以和壳寡糖配位,制备出Ce4+含量为7.65%的壳寡糖铈配合物(COS-Ce)。按照饲料配方分别制备含有COS-Ce0、150、300、600和1200 mg/kg的实验饲料,饲喂6.72±0.01g的刺参8周,测定其生长、免疫和抗病力等指标。研究结果表明,600 mg/kg的COS-Ce对刺参的生长作用显著(0.9-1.2%/d)(P<0.05),刺参体腔细胞的吞噬活性、呼吸爆发活性和免疫酶(T-SOD、ACP及AKP)活性均显著高于对照组(P<0.05)。但是添加量为1200 mg/kg时,吞噬活性、呼吸爆发活性和免疫酶活性均有下降趋势,可能是由于高剂量COS-Ce中的Ce4+对刺参免疫起到了抑制作用。攻毒试验的结果也表明600 mg/kg的COS-Ce提高了刺参的抗病能力(33.33%)(P<0.05)。对比第三章结果,600 mg/kg COS-Ce中Ce4+的含量为45.9 mg/kg,600 mg/kg COS-Ce组的呼吸爆发活性和T-SOD活性高于50 mg/kgCe4+组,同时600 mg/kg COS-Ce组的累计发病率(33.33%)低于50 mg/kg Ce4+组(46.15%),这表明当Ce4+含量相同时,COS-Ce对刺参抗病力的改善明显优于单纯的(NH4)2Ce(NO3)6。
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