前体对白麦霉素合成组分的影响以及代谢机理的研究

• 作 者: 储成亮
• 机 构: 华东理工大学
• 出 处: 华东理工大学
• 发表日期: 2009年期
• 关键词: 柱晶白霉素 代谢机理 甲硫氨酸 麦迪霉素 合成组分

紫外-氯化锂复合诱变对菌株进行了处理,并结合琼脂块培养筛选方法,筛选到菌株N-20s-6、N-20s-13、N-20s-20,效价分别为2461、2085、2127U/mg,最高提高了50.1％。　　
研究了丙酸钠,甲硫氨酸,丙氨酸,缬氨酸,γ-氨基丁酸,丝氨酸,乙酸钠等对效价和产物组分的影响,甲硫氨酸对产物合成最有效,添加0.06％的甲硫氨酸使生物效价提高了61.9％,丝氨酸和γ-氨基丁酸使效价最大提高了23.2％和18％:乙酸钠和丙酸钠也使效价最大提高了31.8％和35.3％％。添加0.08％的甲硫氨酸,麦迪霉素A1提高了135％。　　
培养基中大量的丙酰基前体是提高麦迪霉素A1合成的一个关键因素,在接种前向培养基中加入0.2％的酰基物质使麦迪霉素Al提高了55％,柱晶白霉素A6以及杂质麦迪霉素D和柱晶白霉素A8分别降低了29％,78％和86％。推测出麦迪霉素合成过程中,最后两步分别为大环C3位和碳霉糖上的酰化,其中麦迪霉素D是合成麦迪霉素A1的关键中间产物,同时也证明了在麦迪霉素发酵过程中,丙酰前体是决定组分的关键因素之一。　　
丙酸钠是一种较廉价的物质,培养基中含有一定浓度的丙酸钠能够提高产物中麦迪霉素A1的含量,0.06％的丙酸盐对产物的合成最有利。接种前加入一定浓度的丙酸盐不但有利于麦迪霉素A1的合成,柱晶白霉素A6的合成却受到一定的抑制。但是12小时加入丙酸盐时,产物中各种组分的合成都受到很大程度的抑制,12小时后添加丙酸盐时,各种组分又相继恢复。丙酸盐的最佳作用时机可能与培养基中菌体的生长状态有一定的关系。菌浓为26.5％时,加入丙酸盐的作用效果最好。12小时加入丙酸盐时,菌体的生长停滞,出现明显的二次生长现象,6小时后,菌体开始缓慢生长,54小时左右达到稳定期,比对照晚了近24小时,达到稳定期的菌浓也要高出很多。12小时加入一定的丙酸盐使得生长代谢流大大增加,而产物合成代谢通量降低,终产物中各种组分合成受到一定的抑制。