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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)引起的感染长期以来严重威胁着人类的健康。随着病原菌耐药性问题的日益严重，现有的抗病原菌感染的药物已经不能满足临床上的需求，这迫切需要人们开发具有全新作用机制的新型抗菌药物。近年来的研究表明转肽酶SrtA对于金黄色葡萄球菌的高感染性和高致病性至关重要，因此本课题开展了基于转肽酶SrtA的小分子抑制剂的发现和靶标确证研究。利用基于SrtA结构的虚拟筛选手段获得了SrtA的小分子抑制剂Ⅰ-4，它对金黄色葡萄球菌转肽酶SrtA(Sa-SrtA)的IC50为37.7μM，对酿脓链球菌转肽酶SrtA(Sp-SrtA)的IC50为18.8μM。通过药物化学合成等手段进一步对化合物Ⅰ-4进行结构修饰和改造，活性最好的化合物SD9对Sa-SrtA的IC50提高到了9.3μM，与化合物Ⅰ-4相比较其活性提高了大约4倍。化合物SD9对Sp-SrtA的IC50提高到了0.82μM，与化合物Ⅰ-4相比较其活性提高了20多倍。通过基于反相HPLC的转肽酶活性测定方法进一步确证了化合物SD9可以显著的抑制转肽酶Sa-SrtA和Sp-SrtA对多肽底物Abz-LPATG-Dap(Dnp)-NH2的转肽作用。为了排除化合物对体外酶活实验中所使用的荧光底物的干扰，我们选用天然表面蛋白SasX和IsdA作为转肽底物，结果显示化合物SD9和SD19可以浓度依赖性的抑制Sa-SrtA对表面蛋白SasX和IsdA的转肽反应。随后的活体水平上的实验间接证明了SD系列化合物对金黄色葡萄球菌转肽酶SrtA的抑制活性。基于FITC-IgG的细胞壁SPA含量测定方法证明SD系列化合物中多个化合物可以显著的降低金黄色葡萄球菌细胞壁上SPA的含量，其中化合物SD9的抑制作用有浓度依赖性，随后的Western Blotting实验也验证这一点。进一步的纤维蛋白原粘附金黄色葡萄球菌的实验显示化合物SD3、SD9和SD19都可以降低金黄色葡萄球菌与包埋有纤维蛋白原的96孔板的粘附，其中化合物SD9的活性最明显。总之，本课题的研究为以SrtA为靶标调控金黄色葡萄球菌的致病性提供了概念验证，为以SrtA为靶标的新型抗病原菌感染的药物开发提供了理论基础和较有潜力的先导化合物。