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雌激素是人体内一种重要的内源性物质，通过雌激素受体介导了许多重要的生理功能。芳香化酶是体内介导雌激素合成的限速酶，它以雄激素为底物合成雌激素。过去有研究发现芳香化酶在介导雌激素的非基因组作用中发挥了重要作用，因此通过调控芳香化酶介导的雌激素合成是研究雌激素介导的非基因组作用的重要手段。此外，目前已有的研究手段尚不能有效区分细胞质内的雌激素受体和细胞膜结合的雌激素受体，限制了对细胞膜结合的雌激素受体介导的非基因组的研究。本研究通过筛选，从慈竹（Sinocalamus affinis）中获得了能够调控人卵巢颗粒细胞中芳香化酶表达的新型萜类化合物（SA-20和SA-48），作用机制研究表明这两个化合物并不影响KGN细胞内主要介导芳香化酶表达的cAMP/PKA/CREB途径，而可能通过抑制p38和ERK MAPK磷酸化间接调控芳香化酶的表达。此外，建立了基于磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶的细胞膜蛋白定点标记技术，研究发现该方法可以用于研究细胞膜结合的雌激素受体α的作用机制及相互作用蛋白。这些研究为发现新的具有组织选择特异性的芳香化酶调节剂奠定了基础，为进一步研究雌激素介导的非基因组作用提供了新的研究手段。 1.调控芳香化酶介导的雌激素生物合成的天然产物的筛选及作用机制研究 利用基于人卵巢颗粒样KGN细胞的雌激素生物合成筛选模型，发现SA-20和SA-48(两者都为萜类化合物)明显抑制细胞的雌激素生物合成活性，具有浓度和时间依赖性，其IC50分别为1.093μM和0.5μM。 作用机制研究发现SA-20和SA-48能够明显抑制人卵巢颗粒样KGN细胞中芳香化酶mRNA和蛋白质的表达;该抑制作用主要是通过影响芳香化酶启动子I.3和启动子PⅡ发挥作用;通过过量表达芳香化酶的HEK-293A细胞的芳香化酶活性检测和体外重组芳香化酶活性检测，发现SA-20和SA-48对芳香化酶蛋白活性没有影响;发现SA-20和SA-48不影响细胞中cAMP的含量和CREB蛋白的磷酸化;发现SA-20抑制了p38和ERK的磷酸化，促进了JNK的磷酸化，对Akt/PI3K的磷酸化没有影响，暗示该化合物可能通过影响p38和ERK介导的AP-1途径抑制芳香化酶的转录。 2.细胞膜结合的雌激素受体的荧光标记建立 基于磷酸泛酰巯基乙胺转移酶的体外标记体系;通过比较三种不同的标记短肽（ybbR、A1和S6），发现以A1标签的标记效果最好;通过研究发现将A1融合ERα的C端对ERα蛋白的介导的非基因组作用没有影响;分析了不同条件对细胞膜结合的雌激素受体α荧光标记的影响。