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目的：利用噬菌体展示随机环七肽文库进行筛选获得结核分枝杆菌MTB特异性结合肽，并初步鉴定其与MTB的结合能力；将筛选获得的结合肽与纳米磁珠和荧光量子点偶联，建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的新方法。方法：噬菌体筛选以MTB标准株H37Rv灭活菌体为靶分子，按吸附、洗脱、扩增的生物淘选（简称淘选）过程对噬菌体展示随机环七肽文库进行筛选，并于第2至第4轮的筛选中加入BCG灭活菌体进行反筛，4轮淘选后，从滴度测定平板上各个方位挑取H37Rv和BCG结合单噬菌体各28和27个进行扩增纯化，提取单链DNA进行测序，间接ELISA法检测不同单噬菌体与H3Rv、BCG和3种非分枝杆菌（铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌）的结合活性，鉴定出阳性克隆。将阳性单噬菌体所表达的展示肽体外合成并标记荧光，荧光显微镜观察其与19种分枝杆菌标准株的结合活性；流式细胞仪检测四种合成环肽与H37Rv和BCG的结合活性。利用湿化学方法制备纳米磁珠和荧光量子点，将本室前期筛选获得的MTB特异性结合线性七肽H8以及购买的抗MTB多克隆抗体（Pab）偶联纳米磁珠，获得2种免疫磁珠MNP-H8和MNP-Pab，将H8、抗MTB单克隆抗体（Mab）和抗MTB热休克蛋白65单克隆抗体（Mabc）偶联荧光量子点，获得3种功能化荧光量子点QD-H8、QD-Mab和QD-Mabc，将免疫磁珠和功能化荧光量子点同时与MTB作用，形成三元复合物结构，通过激光诱导荧光仪测量荧光量子点的荧光值以及荧光显微镜观察判定样品中是否存在MTB，建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的新方法。将2种免疫磁珠和3种功能化荧光量子点配对组合，对六组组合的检测下限和特异性进行评估，初步筛选检测MTB的最佳配体分子组合，利用最佳组合进一步探讨免疫磁珠和功能化荧光量子点的最佳工作浓度和最佳工作时间。利用H37Rv、田鼠分枝杆菌和11种NTM标准株菌悬液和模拟痰标本以及3种非分枝杆菌（铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）标准株，对所建立检测方法的检测下限和特异度进行初步评估。结果：经过4轮淘选，能与靶分子特异性结合的噬菌体得到明显富集。单噬菌体测序分析共获得16种共同序列。间接ELISA检测结果表明，单噬菌体SB1、SB5、SB8和SB26与H37Rv和BCG的亲和力均较高（S/N≥2.1）确定为阳性克隆。荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果单噬菌SB1、SB5、SB8和SB26四种环肽均显示出较高的亲和特异性，可与线性肽H8组合用于MTB检测。湿化学方法合成的纳米磁珠和荧光量子点显微镜下观察，均有较规则的形态和分散性。偶联菌体结合肽H8的免疫磁珠和功能化荧光量子点均能与H37Rv结合，镜下可见其与H37Rv作用的三元复合物，实验组与对照组的荧光值比值约为4∶1。通过H37Rv不同稀释度，田鼠分枝杆菌、11种NTM以及3种非分枝杆菌检测，获得最佳配体组合QD-H8与MNP-H8组合，免疫磁珠和功能化荧光量子点最佳工作浓度均为100μg/ml，最佳工作时间为2h。H37Rv菌悬液和模拟痰标本的检测下限均为103cfu/ml；检测11种NTM以及田鼠分枝杆菌时，显微镜观察仅见偶发分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、金色分枝杆菌和副偶发分枝杆菌有红色荧光，荧光值也仅此四种分枝杆菌为阳性；3种非分枝杆菌检测结果均为阴性。结论：利用噬菌体展示随机肽库技术淘选获得与MTB标准株H37Rv有较高亲和性及特异性的结合环肽；利用噬菌体展示肽与2种纳米探针，成功建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的新方法，检测下限达到103cfu/ml，特异性较高，有可能为结核病的早期快速检测提供一种新的有效手段。