论文部分内容阅读
目的:探讨DNA-PKcs缺失对人恶性胶质瘤细胞中Ⅰ型干扰素表达的影响。
方法:选用人恶性胶质瘤细胞M059J和M059K为细胞模型,首先我们通过免疫组化和蛋白印迹法验证了M059J细胞中DNA-PKcs蛋白缺失的情况,并用实时定量PCR证实了M059J细胞中DNA-PKcs基因的低表达,明确了M059J和M059K细胞中DNA-PKcs的表达情况。通过实时定量PCR的方法,我们分别检测了DNA-PKcs缺陷的M059J细胞和正常表达DNA-PKcs的M059K细胞中Ⅰ型干扰素、IL-6的表达,并进一步分析poly I:C和CpG诱导下两种细胞中Ⅰ型干扰素的诱导表达情况,以及poly I:C和CpG诱导前后两种细胞中miR-155的表达水平。
结果:(1)DNA-PKcs缺陷的M059J细胞中内源性IFN-α、IFN-β及IL-6的表达均高于DNA-PKcs正常表达的M059K细胞。(2)DNA-PKcs缺陷的M059J细胞和DNA-PKcs正常表达的M059K细胞均可在poly I:C的作用下诱导Ⅰ型干扰素的表达。(3)CpG诱导下两株细胞均表现为无Ⅰ型干扰素应答。(4)DNA-PKcs缺陷的M059J细胞中内源性miR-155的表达显著高于DNA-PKcs正常表达的M059K细胞,但在poly I:C和CpG诱导前后两株细胞中miR-155的表达无显著变化。
结论:DNA-PKcs缺陷可上调人恶性胶质瘤细胞中Ⅰ型干扰素的表达,可能与miRNA-155的调控相关。