【摘 要】
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目的:通过观察不同比例多不饱和脂肪酸对体外培养的人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖作用影响,初步探讨不同比例多不饱和脂肪酸对人子宫内膜癌细胞可能的作用机制,为多不饱和脂肪
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目的:通过观察不同比例多不饱和脂肪酸对体外培养的人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖作用影响,初步探讨不同比例多不饱和脂肪酸对人子宫内膜癌细胞可能的作用机制,为多不饱和脂肪酸在临床中治疗人子宫内膜癌提供实验和理论依据。 方法:人子宫内膜癌细胞Ishikawa常规培养于含10%胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的High-Glose DMEM培养液中,在37℃、5%CO2及饱和湿度培养箱中培养。根据预实验情况,实验分对照组,n-6组,n-6/n-3为10∶1组,n-6/n-3为1∶1组,n-3组。采用MTT法检测不同比例多不饱和脂肪酸处理Ishikawa细胞24h后,对Ishikawa细胞增殖的影响;倒置显微镜法观察各组细胞形态学改变;RT-PCR和Western blot法测定不同比例多不饱和脂肪酸处理Ishikawa细胞24h后Akt、mTOR、VEGF三者的基因转录和蛋白的表达变化。 结果:MTT结果显示不同比例多不饱和脂肪酸处理Ishikawa细胞24h后,各组细胞增殖情况各异:单纯n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs能够明显促进Ishikawa细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),单纯n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs则显著抑制细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测结果显示单纯n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs作用Ishikawa细胞24h后Akt、mTOR、VEGF的mRNA表达增加(P<0.05),单纯n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs使Akt、mTOR、VEGF的mRNA表达下降(P<0.05); Westernblot检测结果显示单纯n-6 PUFAs和10∶1 n-6/n-3 PUFAs作用Ishikawa细胞24h后Akt、mTOR、VEGF蛋白表达增加(P<0.05),单纯n-3 PUFAs和1∶1 n-6/n-3PUFAs使Akt、mTOR、VEGF蛋白表达下降(P<0.05)。 结论:不同比例n-6/n-3PUFAs在体外条件下可作用于人子宫内膜癌Ishikawa细胞,随着n-6PUFAs浓度增加,可促进人子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖,与之相反,n-3 PUFAs浓度增加可促进其凋亡;不同比例n-6/n-3PUFAs作用于人子宫内膜癌Ishikawa细胞,可引起Akt、mTOR、VEGF表达水平变化;不同比例n-6/n-3PUFAs对人子宫内膜癌细胞Ishikawa的作用机制可能通过影响PI3k/Akt/mTOR通路上调或下调VEGF表达,调节新生血管再生情况,从而调控细胞增殖或凋亡情况。
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