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2002年6月至12月中旬,用菌核作诱饵,研究了不同时间内雅安油菜土壤中菌核表面和内部真菌种类及其数量变化,从不同埋藏时间的4批共200颗菌核分离到粘帚霉(Gliocladium spp.)、木霉(Trichoderma spp.)、镰刀菌(Fusarium spp.)、青霉(Penicillium spp.)、毛霉(Mucor spp.)、根霉(Rhizopus spp.)、曲霉(Aspergillus spp.)、腐霉(Pythium spp.)等8个属的真菌,共计171个菌株。其中粘帚霉和木霉平均分离频率分别达47.68%和32.42%,是油菜土壤中核盘菌菌核上的优势真菌类群。所分离到55株木霉中康氏木霉(T. koningii)17株,哈茨木霉(T. harzianum)16株,黄绿木霉(T. aureoviride)9株,绿色木霉(T. viride)7株,其余6株属于3种木霉分别为:拟康氏木霉(T. pseudokoningii)、钩状木霉(T. hamatum)和长枝木霉(T. longibrachiatum)。随着菌核在土壤中埋藏时间增加,木霉种类发生明显的变化,哈茨木霉和康氏木霉出现最早,而绿色木霉和黄绿木霉出现较迟,拟康氏木霉、钩状木霉和长枝木霉出现最晚。通过PDA平板对峙培养、代谢产物抑菌作用和离体叶片法测定等筛选出2个木霉和2个粘帚霉菌生防菌株T3、T8、G4、G8。 供试生防菌株发酵条件试验表明:菌株T3、T8、G4、G8最佳产孢条件有差别,但差别不大。T3、T8、G4、G8在廉价的谷壳-麦麸培养基培养时,在初始弱酸环境,25℃、7/10通气量,培养196小时的情况下产孢量最高,且较为经济。 T3、T8、G4、G8的非挥发性代谢产物对核盘菌菌丝的生长均具有较高的抑制率,达80%以上。木霉菌株T3产生的代谢产物的稳定性较好,即使在121℃条件下处理30min,抑制率仍可高达77%以上。生防菌株T3、T8、G4、G8的发酵液及稀释液在离体叶片试验中均有明显的抑制效果,抑制率在74.14%~89.66%。但不能完全控制核盘菌的再侵染。生防菌株不同浓度的孢子悬浮液对核盘菌均有抑制作用,T3、T8、G4、G8在孢子浓度为10~7个孢子/mL时,各供试菌株抑制效果均在94%以上,发病率明显降低。 田间试验结果表明,生防菌株各项处理的病情指数大大低于对照,但明显高于菌核净。木霉菌株T8发酵液相对防效为62.96%,达到菌核净防效的84.5%;T8的孢子悬浮液相对防效达58.84%,达到菌核净防效的75%以上。而G4、T3发酵滤液对油菜菌核病的相对防效也较好,达到菌核净防效的80%以上;G8发酵滤液相对防效达到菌核净防效的75%以上;说明T8的活菌制剂,T3、G4、G8的代谢产物,具有潜在的市场应用价值。