【摘 要】
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脱碱基位点是一种常见的DNA损伤,源于N-糖苷键断裂而使碱基脱落。辐射、烷基化试剂和一些抗癌药物等可能会造成碱基脱落,因此脱碱基位点作为标志性损伤能够帮助疾病早期筛查、
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脱碱基位点是一种常见的DNA损伤,源于N-糖苷键断裂而使碱基脱落。辐射、烷基化试剂和一些抗癌药物等可能会造成碱基脱落,因此脱碱基位点作为标志性损伤能够帮助疾病早期筛查、药物毒副作用评价、环境污染物毒性评价等。目前已有不同的检测方法用于脱碱基位点的定量、定性分析,包括32P后标记法、LC-MS、ELISA及化学探针检测法等。另一方面,由于脱碱基位点在双链DNA内形成疏水空腔,能够结合小分子,使得脱碱基位点作为结合位点被用于小分子检测、构建适配体传感器及SNP检测。
在DNA碱基脱落损伤检测方面,本文选用荧光小分子ATMND在缓冲溶液条件下对脱碱基位点DNA构建了检测模型。结果显示ATMND对嘧啶有很强的识别能力,结合常数达1.9×107 M-1。
在含有脱碱基位点DNA的应用方面,本文采用11bp含有脱碱基位点DNA,结合胞嘧啶碱基类似物-毗咯胞嘧啶,成功构建了针对哮喘药物茶碱的识别元件AXA/TpCT(:)5-TGCA TpCTACGG-3/3-ACGT AXATGCC-5,X=脱碱基位点,pC-吡咯胞嘧啶。AXA/TpCT识别元件对茶碱具有强特异性,且成功实现了在血清中直接检测茶碱的血药浓度。
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