雷公藤甲素-姜黄素共载纳米系统对卵巢癌的治疗研究

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本文旨在研究共载雷公藤甲素和姜黄素的钙磷复合纳米颗粒对卵巢癌的治疗效果。首先,本文构建了共载雷公藤甲素和姜黄素的钙磷复合纳米递送系统,建立了雷公藤甲素和姜黄素的含量测定方法,并通过正交实验设计进行了处方优化;随后,验证了共载雷公藤甲素和姜黄素的钙磷纳米颗粒(TP&Curc/CaP NPs)在体外抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖效果;最后,用人卵巢癌SKOV-3细胞建立了卵巢癌皮下移植瘤模型并观测了纳米递送系统对卵巢癌的治疗效果。  本研究主要内容包括:⑴采用超声乳化法制备了TP&Curc/CaP NPs纳米粒,并对其进行了粒径表征和细胞相容性实验的考察。通过计算药物协同指数(CDI)来筛选雷公藤甲素和姜黄素发挥协同作用的最佳药物浓度。以载药量和包封率为考察指标,通过正交实验设计优化了纳米粒的制备工艺得出了最佳处方。通过细胞增殖抑制实验、细胞周期阻滞实验和细胞凋亡诱导实验分析了纳米粒对SKOV-3细胞的杀伤作用。建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,每周用TP&Curc/CaP NPs通过尾静脉注射给药两次,治疗期间观察裸鼠活动情况,并记录肿瘤的体积和裸鼠的体重,治疗三周以后用颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离肿瘤和心、肝、脾、肺、肾,做病理切片考察各给药组药物或纳米颗粒的安全性。⑵经过四因素三水平的正交实验设计,制备纳米粒的处方优化后所制备的纳米粒的平均粒径为221.7纳米,包封率为73.58%,整体载药量为1.22%;当雷公藤甲素的浓度为25.22 ng/ml,姜黄素的浓度为6.62μg/ml时,二者能发挥最佳协同治疗效果。流式细胞学结果表明该纳米粒能将SKOV-3细胞周期阻滞在S期和G2/M期,并能通过上调caspase-3/9的水平诱导细胞凋亡。动物实验结果表明纳米粒能显著抑制卵巢癌的生长,并且抑瘤率达到了68.78%。病理结果表明经过钙磷材料的包覆,雷公藤甲素对肝脏和肾脏的毒副作用明显降低。综上所述,本文选用生物相容性良好的钙磷材料作为药物递送的载体,创新性地制备了雷公藤甲素和姜黄素共递送的纳米载药颗粒,有效减低了雷公藤甲素的毒性并提高了其对抗卵巢癌的作用效果。
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