【摘 要】
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根据成熟蜜瓜的ACC氧化酶mRNA设计并合成了针对该基因的锤头型核酶及反义RNA,构建的多聚核酶-反义RNA基因克隆到植物表达载体pGA643中35S组成型启动子下游.通过对启动子、密
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根据成熟蜜瓜的ACC氧化酶mRNA设计并合成了针对该基因的锤头型核酶及反义RNA,构建的多聚核酶-反义RNA基因克隆到植物表达载体pGA643中35S组成型启动子下游.通过对启动子、密码子及Kozak序列的分析可知该序列虽然可编码三个短肽(两个三肽,一个六肽),但是也只能转录成RNA,而不能翻译成蛋白质.因而设计合成的这段序列有可能在植物体内起作用以通过抑制果实成熟期ACC氧化酶基因的表达而延长蜜瓜的保鲜期.该文以植株再生频率为重点分析比较了几种子叶为外植体的再生系统.在几种激素配比组合中较为合适的再生系统是成熟种子的子叶在含有BA0.5mg/l,IAA0.05mg/l的MS培养基上进行芽诱导,在BA0.5mg/l,IAA0.05mg/l的培养基上进行芽伸长.通过子叶与携有受35S组成型启动子控制的AR-HhRz的Ti质粒的农杆菌共培养,进行卡那霉素抗性选择产生转基因小植株.通过对转基因再生植株进行PCR检测,可以初步证实外源基因已转入蜜瓜.
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