新型Rotor孔雀绿激活型荧光探针分子的合成及在活细胞中的应用

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lailinyang
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孔雀绿(MG)是一种典型的Rotor分子,其荧光对周围微环境有着高度的敏感性。目前将MG染料运用到RNA、膜蛋白、多种细胞器的荧光造影中,体现出长波长、背景荧光低免洗、荧光增强倍数高等优点。所以这就吸引着我们去开发性能更优良的MG染料来扩大其在活细胞中的应用。针对MG的研究做了以下两方面的工作:  (1)合成了两种新型吡咯烷MG染料和久洛尼定MG染料。与传统MG染料相比,这两种新型染料的紫外吸收波长、荧光发射波长均有一定红移,荧光量子产率得到进一步的提高。通过对染料在不同溶剂、体系粘度、温度下的吸收荧光性质的测试发现它们对溶剂极性不敏感,对粘度、温度比较敏感,在高的粘度和低温环境下,荧光发生明显的增强。  (2)对以上三种MG染料分别通过更换连接基团长度(丁、乙、甲酸连接基)、取代位置(邻、间、对)、以及不同标签技术(SNAP-tag,TMP-tag,Halo-tag)进行筛选得到一系列探针。所合成的探针在细胞内蛋白标记实验中,未能实现荧光的特异性激活;而在细胞内溶酶体定位实验中,其中丁酸为连接基团的吡咯烷MG探针可以特异性的在溶酶体激活,没有背景荧光,达到了免洗型溶酶体标记的目的。
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