【摘 要】
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目的:观察蛋白酶体抑制剂MG-132对淋巴细胞白血病细胞株L1210的致凋亡作用,并且从Caspase3及NF-κBp65方面探讨其在致凋亡中的作用。
方法:分别以不同浓度的蛋白酶体抑
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目的:观察蛋白酶体抑制剂MG-132对淋巴细胞白血病细胞株L1210的致凋亡作用,并且从Caspase3及NF-κBp65方面探讨其在致凋亡中的作用。
方法:分别以不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG-132处理L1210细胞,实验分为A(对照组)、B、C、D和E5组,其细胞培养液中MG-132的药物终浓度分别为0、2.5、5、10和20μmol/L,在相同的时间点(24h)收集细胞,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,应用Annexin-V和PI双染细胞流式法检测细胞凋亡率,比色法测定细胞中Caspase3的活性,采用Western-blot法检测细胞NF-κBP65核蛋白的表达。
结果:1.实验B、C、D、E组均可明显抑制L1210细胞增殖,其增值抑制率较对照A组明显增加(P＜0.01),随着MG-132浓度的增加,其抑制率逐渐升高,20μmol/LMG-132作用于L1210细胞24小时以后细胞增值抑制率为(72.70±5.75)％。2.实验B、C、D、E组细胞凋亡率较对照A组明显增加(P＜0.01),细胞凋亡率与MG-132呈浓度依赖性,20μmol/LMG-132作用于L1210细胞24小时以后细胞凋亡率为(45.43±2.16)％。3.实验B、C、D、E组Caspase3的活性较对照A组明显增加(P＜0.01),但是10μmol/L与20μmol/L组相比差异没有统计学意义(P＞0.05)。4.NF-κB p65核蛋白在各组L1210细胞中均有表达,实验B、C、D、E组电泳条带灰度值逐渐降低,与对照A组相比差异均具有统计学意义,组间两两比较也有统计学意义(P＜0.01)。
结论:1.蛋白酶体抑制剂能够抑制L1210细胞增长,诱导L1210细胞凋亡。2.可以活化L1210细胞中Caspase3的活性。3.可以下调L1210细胞中NF-κB的表达。
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