【摘 要】
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截型苜蓿(Medicagotruncatula)是豆科模式植物，被广泛用于豆科作物的生理、遗传和分子生物学研究。截型苜蓿的再生和遗传转化系统的建立对豆科作物功能基因组的研究和作物品种
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截型苜蓿(Medicagotruncatula)是豆科模式植物，被广泛用于豆科作物的生理、遗传和分子生物学研究。截型苜蓿的再生和遗传转化系统的建立对豆科作物功能基因组的研究和作物品种改良至关重要。然而截型苜蓿的遗传转化体系存在许多问题，例如再生周期长、体细胞胚胎分化困难、基因型依赖性强等，有必要进一步优化。本试验选用4个截型苜蓿基因型为材料，比较了不同培养方案对不同基因型再生的影响；并利用农杆菌介导的转化方法，对不同途径的转化体系进行了比较研究，得到了如下结果：(1)成功地建立了截型苜蓿高频体细胞胚胎再生体系。通过比较不同培养方案对4个基因型再生的影响，确定了第二方案为最佳培养方案。(2)确定了最佳的侵染时间、共培养时间、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度和外植体苗龄等转化条件，优化了农杆菌介导的基于体细胞胚胎发生途径的截型苜蓿遗传转化体系。(3)建立和优化了农杆菌介导的基于器官发生途径的截型苜蓿遗传转化体系。确定了后期选择筛选方法有利于抗性植株的再生。(4)利用基因型R108体细胞胚胎发生途径建立的再生和转化体系，成功地将抗潮霉素基因(hptⅡ和植酸酶基因(168phyA)导入了截型苜蓿。并通过PCR扩增证实基因已整合到苜蓿的基因组中。本研究优化了豆科模式植物截型苜蓿的再生和转化体系，从而为豆科植物功能基因组研究提供良好的遗传研究平台。
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