【摘 要】
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本研究采用基因工程方法将乙烯信号传递因子(NTHK1)基因导入苜蓿，以期培育出叶片增大并耐盐的转基因苜蓿，用以改良苜蓿品系，解决盐碱地开发利用问题。 NTHK1基因，是一种被称为
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本研究采用基因工程方法将乙烯信号传递因子(NTHK1)基因导入苜蓿，以期培育出叶片增大并耐盐的转基因苜蓿，用以改良苜蓿品系，解决盐碱地开发利用问题。
NTHK1基因，是一种被称为烟草乙烯受体的信号传递因子，具有增大叶片和耐盐的功能。实验以保定苜蓿为受体材料，以农杆菌介导法将乙烯信号传递因子(NTHK1)基因导入苜蓿，并获得叶片明显增大的转基因植株，为增加蛋白质含量、改良苜蓿品质的育种研究开辟了一条潜在的途径。同时，在转化过程中，对影响转化的各个环节作了进一步探讨，从而进一步完善了高效的苜蓿遗传转化体系。
本实验获得转NTHK1基因植株64株。对其中的19株再生植株进行PCR检测发现，阳性植株为2株。对PCR阳性植株进一步作RT-PCR鉴定，结果均为阳性。表明NTHK1基因已整合到苜蓿基因组中并且在转录水平上已表达。
其中一株转基因植株的叶片比对照明显增大，经叶片面积测算表明，转基因苜蓿叶片面积为对照的2.5倍，显示出NTHK1基因具有增大叶面积的功能。
对不同浓度下转基因植株及对照植株叶片中游离脯氨酸的测定表明，转基因植株中脯氨酸含量高于对照。当盐浓度增加时，脯氨酸含量随着胁迫浓度的增加和时间的增长而升高。
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