【摘 要】
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禽流感(avian influenza，AI)病毒的基质蛋白M1是一种具有重要功能的结构蛋白，理论分子量为28kDa。本论文分为两部分，第一部分，根据NCBI已公布的禽流感病毒M1的基因序列，设计引物，以
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禽流感(avian influenza，AI)病毒的基质蛋白M1是一种具有重要功能的结构蛋白，理论分子量为28kDa。本论文分为两部分，第一部分，根据NCBI已公布的禽流感病毒M1的基因序列，设计引物，以pGEM-T-M1(中国农业大学刘金华教授赠送，属于禽流感病毒H9N2亚型)作为模板，PCR扩增得到了cDNA片段，经序列测定，与其它报道序列(A／chicken／Heilongjiang／48／01(H9N2))核苷酸序列的同源性在99％以上，结果显示此cDNA片段可作为H9N2亚型M1的基因序列使用。然后，利用酵母双杂交系统，筛选人肾cDNA文库中与M1相互作用的蛋白质，得到了人的五种蛋白，分别是C1q、CAP、AHA1、Adolase B、PPIE，并且利用酵母双杂交回转实验验证了M1与筛选出蛋白的特异性相互作用。 第二部分利用GST-pull down方法验证M1与筛选出蛋白的特异性相互作用。我们首先根据NCBI已公布的AHA1、PPIE、PPIA的基因序列，设计3对引物，以人肾cDNA文库作为模板，PCR扩增得到了3种蛋白的cDNA片段，经序列测定，与NCBI已公布序列的同源性都为100％。将M1、AHA1、PPIE、PPIA蛋白进行了原核表达，利用GST-pull down实验证明M1与宿主细胞蛋白AHA1、PPIE、PPIA之间有相互作用。目前的实验结果提示，禽流感病毒基质蛋白M1有可能通过与宿主细胞蛋白的相互作用参与病毒的装配和出芽。
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