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人溶菌酶以其独特的优越性和多种药理作用效果而在临床上有着重要的应用价值，但天然人溶菌酶来源极其稀少且可能含有未知病原而远不能满足市场需要。利用重组DNA技术进行生产有效地解决了人溶菌酶需求大而来源少的矛盾，然而目前主要的提取步骤中，超滤浓缩发酵上清液造成酶在膜上的吸附和活性损失，后续的强阳离子柱层析处理量小，成本高，成为其大规模生产的瓶颈。
双水相萃取是分离和纯化酶及蛋白质生物活性物质的一种新型方法，具有作用条件温和、产品活性损失小、处理量大、分离步骤少、无有机溶剂残留、设备投资小、操作简单、易于工程放大和连续操作等显著技术优点，非常适合大规模应用。
本文采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶，研究了聚乙二醇(PEG)平均相对分子质量、PEG浓度、硫酸钠和氯化钠浓度、体系pH值对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。实验表明体系物料配比在PEG4000、Na2SO4和NaCl质量分数分别为ρ=0.08、0.13、0.06，pH值为5.6时，在室温下的双水相萃取率达96.63％，纯化因子为6.5。