熟地黄对甲氨蝶呤化疗副作用的预防作用及其机制研究

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癌症严重威胁着人类的生命健康,其治疗手段多样,其中化疗为首选。可是,化疗后患者常出现不同程度的毒副作用,如气短乏力、精神萎顿、腹胀纳呆、口干咽燥、舌红少津、干呕呃逆、排便紊乱、自汗、盗汗等症状,中医辨证多属于气虚和阴虚。中医治疗方剂中常含有熟地黄(SRR),究竟SRR在防治化疗副作用方面发挥了何种作用至今尚不明确。本文以甲氨蝶呤(MTX)制备了大鼠化疗模型,以MTX解毒剂亚叶酸钙(CF)为对照,首次评价了SRR对化疗副作用的防治效果,揭示了其作用机制,并评价了CF和SRR的联合用药的防治效果。此外,还对SRR的活性部位进行了初步探索。主要内容如下:1.SRR对化疗副作用的防治效果将30只Wistar雄性大鼠分为空白组、MTX组、SRR组、CF组以及SRR+CF组,SRR早晚各一次(1.08 g/kg, i.g.);第四天造模(MTX,25 mg/kg, i.p.,空白组给等体积生理盐水),36 h后开始每天给药CF(1 mg/kg, i.g.)。第八天取全血及空肠测定相关指标。结果发现:(1)MTX组大鼠精神萎靡,饮食量减少,毛色黯淡,有腹泻现象,体重增加显著低于空白组;SRR组大鼠上述状况明显改善。(2)MTX组大鼠白细胞、淋巴细胞以及单核细胞显著低于空白组,红细胞、血红蛋白、红细胞压积、大血小板比率以及血小板平均宽度则显著升高;SRR组大鼠细胞计数指标有不同程度改善。(3)MTX组大鼠空肠损伤指数为空白组的4.31倍,绒毛高度仅为空白组的33.77%,PCNA染色阳性细胞仅为空白组的51.95%;SRR组则显著改善。(4)MTX组大鼠肠粘膜MDA和TNF-a含量分别为空白组的1.94和2.57倍,而GSH含量仅为空白组的10.27%;SRR预防给药显著改善了这些异常变化。(5)CF以及CF和SRR联合给药的疗效不及SRR。2.SRR对K562白血病细胞株生长情况的影响于K562白血病细胞培养体系中添加不同浓度的SRR水提液,用MTT法评价细胞生长状况,发现SRR对该细胞株的增殖具有抑制活性,且生药剂量在0.046875-1.5 mg/mL范围内具有量效关系。3.SRR活性部位的初步筛选用阴离子交换树脂对熟地黄水提液进行吸附,用不同酸度的水溶液洗脱得到11个部位,进行DPPH自由基清除和AAPH诱导的红细胞溶血抑制实验,结果发现中性部分活性最高。本文结果说明:SRR能够防治化疗导致的副作用,特别是肠道黏膜炎,其作用机制为抗氧化和抗炎,其中不带负电荷的部位可能是其主要活性部位。SRR对白血病细胞增殖具有一定的抑制活性,提示其不会影响MTX的抑瘤活性。
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