低分子量K-卡拉胶O-琥珀酰基化衍生物的合成、表征及生物活性的研究

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将k-卡拉胶(KC)在酸性条件下降解得到数均分子量为10060的低分子量卡拉胶(LMW-KC)并制成四丁基铵盐,然后溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,以4-二甲基氨基吡啶(DMAP)和三丁基胺作为催化剂,于60?C和80?C分别与琥珀酸酐进行酰化,制备了LMW-KC的O-琥珀酰基化衍生物。同时借助IR、GPC、13C NMR、1H NMR、1H/1H COSY、13C/1H HMQC、13C/1H HMBC、TGA和元素分析等方法对合成过程、产物的结构和性质进行分析表征,并对低分子量k-卡拉胶及其各衍生物的体外抗氧化活性和抑菌活性进行了初步研究。实验结果表明:  在0.1M的盐酸中对k-卡拉胶降解1h,得到重均分子量为15350、数均分子量为10060的低分子量k-卡拉胶,与降解前的k-卡拉胶相比,其结构单元未被破坏,也没有产生脱硫现象。  在60?C和80?C下反应6 h合成了取代度分别为2.60和2.92的LMW-KC O-琥珀酰基化衍生物。分析发现:低分子量k-卡拉胶与琥珀酸酐形成单酯化合物,且其二糖重复单元结构没有被破坏。k-卡拉胶的-(1→3)-β-D-半乳糖-4-SO4-单元(简写为bGalp4) C2位上的羟基被完全取代,bGalp4 C6位和-(1→4)-a-D-3,6-内醚半乳糖-单元(简写为aAnhy)C2位上的羟基被部分取代。LMW-KC酰化后热稳定性明显增强。  低分子量k-卡拉胶 O-琥珀酰基化衍生物对羟自由基(·OH)和超氧阴离子(·O2-)及 H2O2诱导红细胞溶血的清除作用较酰化之前明显增强,尤其是在60?C下反应6 h获得的产物,其对·OH和H2O2诱导红细胞溶血的清除率可分别高达92.35%和97.14%;且其对·O2的清除作用也较其他酰基化产物强,可达到26.2%,几乎是同浓度LMW-KC清除率的2倍。
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