论文部分内容阅读
替米考星具有广谱的抗菌活性,在临床上常被作为治疗鸡毒支原体病的理想药物,本研究测定了替米考星对鸡毒支原体的体外抗菌活性,同时建立体外PK-PD模型。通过成功建立一级吸收一室模型,并模拟不同的临床给药剂量,以期为临床优化给药方案提供依据。本文测定了替米考星对鸡毒支原体的体外抗菌活性,用微量稀释法测得的105和107 CFU/mL菌量的MIC值分别为0.01和0.02μg/mL。采用琼脂稀释法测定105、107和109 CFU菌量的MIC值分别0.02、0.04和0.16μg/mL。在不同药物浓度下（064 MIC）的静态杀菌曲线结果表明,浓度高于1 MIC在36 h后鸡毒支原体都能降到检测限以下,达到最大杀菌效果。随着MIC倍数的增加,杀菌速率也在增加,但增加的幅度趋于平缓,可达最大杀菌速率为0.53 h-1。本研究基于准确模拟感染鸡肺组织药物浓度,根据临床推荐给药剂量在体外动态模型中设计7个不同的剂量组（1、2.5、5、7.5、10、15和20 mg）,同时监测菌量和鸡毒支原体的敏感性变化。体外动态模型中,5天后所有剂量组替米考星都产生了杀菌效果,最大杀菌效果使菌量下降了6.51 Log10CFU/mL。采用抑制型Sigmoid Emax模型分析结果,AUC24h/MIC、Cmax/MIC、%T>MIC与抗菌效果之间的相关性分别为0.87、0.88和0.49。结果表明:在体外模型中替米考星对鸡毒支原体的抗菌效果与Cmax/MIC相关性最高。鸡毒支原体数量降低1 Log100 CFU/mL所对应的Cmax/MIC、AUC24h/MIC分别为2.17和62.58 h。试验表明替米考星对鸡毒支原体展现浓度依赖性的特点。7个给药剂量下均筛选出敏感性降低的鸡毒支原体菌株,用微量稀释法测得其MIC,其中M3、M4、M5这三株MIC值显著升高。同时测定其对泰乐菌素、红霉素、多西环素、阿米卡星等不同抗菌药物的敏感性,发现所有敏感性降低的菌株对同类大环内酯类药物泰乐菌素和红霉素的敏感性均降低,但对阿米卡星和多西环素的敏感性未发生变化。以标准菌株S6为参考基因组,通过单核苷酸多态性分析基因突变位点。M3、M4、M5三株菌在编码核糖体蛋白L4和L22的rplD和rplV基因上均未发现突变位点。M4菌株在23S rrnA结构域II区和V区未发现突变位点。M5菌株在23S rrnA结构域II区发生G495T突变,V区未发现突变位点。M3菌株在23S rrnB结构域II区发生T854A突变,V区发生G2799A突变。这些突变位点都未被报道过。