应用流式细胞术研究普通小球藻的生长代谢条件及其优化培养

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微藻具有培养周期短、产油效率高、油脂质量好、环保优势强、占地面积小和改造空间大等优点,是继粮食油脂和纤维素油脂后的第三代生物燃料的来源。目前大规模培养小球藻的方式主要是自养方式的开放池培养,这种培养方式下的小球藻产量和油脂含量是制约微藻能源商业化生产的关键因素之一。流式细胞术是利用流式细胞仪对处于快速直线流动状态的生物颗粒或者细胞进行多参数、快速、准确、客观的定量分析和分选的技术。能够根据单个微藻细胞的不同特征和生理状态(如代谢活力、生存能力、细胞的组成和形态等)对藻细胞进行即时的快速计数、检测和分选,在微藻培养过程中监测微藻的生理变化,从而来控制或者优化培养条件来获得高生物量和代谢产物。  本文以普通小球藻为原料,使用流式细胞术优化了测定小球藻酯酶活性和油脂含量的荧光染料的条件,找出快速测定小球藻油脂含量的方法,并且利用流式细胞术研究了不同氮源浓度和不同光质比LED对小球藻生长情况、叶绿素荧光、酯酶活性、油脂含量和油脂产量的影响。实验结果表明:不同的氮源浓度和光质比对小球藻的生长和代谢都有显著的影响(p<0.05)。小球藻生长和油脂产量最高的硝酸钠浓度范围为1.0g/L-1.5g/L,此时小球藻的生物量为59.26g/L-62.61g/L,油脂产量为14.24g/L-14.27g/L。氮缺乏虽然能够提高小球藻的油脂含量,但是因为生物量较低,导致油脂产量较低,并不适合用来提高小球藻的油脂产量。红色LED光源下小球藻的生物量和油脂产量最高,分别为49.71g/L和17.83g/L是培养小球藻的最佳光源,这主要是因为红光能够提高小球藻光合作用活性。
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