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大蒜（AlliumsativumL.）为百合科葱属植物，自然条件下的大蒜一般受到两种或两种以上病毒的侵染。大蒜是无性生殖作物，在生产上一般采取留种栽培，因此病毒在大蒜植物体内逐代累积，严重影响了大蒜的产量和质量。目前侵染大蒜的病毒主要有香石竹潜隐病毒属、马铃薯Y病毒属和青葱X病毒属成员等。对于植物病毒的鉴定，使用得比较广泛的有电子显微镜鉴定法，血清学法和分子生物学法，其中最灵敏、特异性最强的是分子生物学法，本实验采取的是RT-PCR法，是从核酸的层面上来检测大蒜病毒。本实验的主要研究有： 1.首先大致调查国内大蒜病毒病的发生情况，本实验收集了四个大蒜主要产区的样品进行实验，他们分别来自于贵州、四川、陕西、重庆。首先是采用传统RT-PCR法检测病毒，通过提取大蒜的总RNA，逆转录合成cDNA，根据已发表的大蒜3端保守序列设计引物进行PCR扩增，获得的目的片段连接载体后导入到大肠杆菌中克隆，提取质粒酶切后送往上海生工测序，序列结果与GenBank中收录的序列分析比对后得知从大蒜样品上分离到的病毒是香石竹潜隐病毒属的大蒜潜隐病毒、马铃薯Y型病毒和大蒜新型病毒。 2.对扩增出的目的片段作单链多态性分析，本实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行分析，PAGE能精确的检测出相同长度的DNA一个碱基上发生的变化。4个样品的PCR产物热变性处理后使其双链DNA解螺旋变为单链，经PAGE电泳后均只出现了两条主带，分别是两条单链DNA，说明不同样品中的同一病毒之间不存在差异，也未有突变发生。 3.在传统RT-PCR技术的基础上，对实验进行了改良和优化，改良了RNA的提取方法大大缩短了实验时间；优化了PCR反应过程，增加了循环次数，并尝试了一步法两步法等，寻找最适宜的扩增条件，最终建立起一套快速检测大蒜病毒的方法，在保证了相同灵敏度和特异性的同时缩短了检测时间。 4.目前防治大蒜的病毒病最有效的方式是培育和推广使用无毒苗，实验采用了高温脱毒法和药物脱毒法处理大蒜的根尖，将脱毒厚的根尖经组织培养再生诱导成新的植株，最终在药物脱毒法处理后的大蒜植株中获得无毒苗。若将此无毒苗投入生产，便可获得无毒的大蒜优良种。