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成膜体是植物细胞特有的胞质分裂器,在细胞核分裂完成后执行细胞板的合成及胞质分裂。已知微丝参与了成膜体结构的构成,但对于微丝在成膜体起始过程中的动态变化及其功能的了解还十分有限。
在本研究中,利用能够稳定表达微丝标记蛋白GFP-fABD2的烟草BY-2细胞系,我们详细观察了微丝在成膜体起始过程中的精细结构和动态变化。结果表明在姐妹染色单体分离后,在两组新形成的染色体之间形成了两组微丝带,随后它们向细胞中央移动并在细胞中部相遇,形成成膜体微丝结构。对该细胞系进行FM4-64染色的结果表明,随着两组微丝带间距离的逐渐缩小,FM4-64标记的囊泡在两组微丝带之间聚集融合形成细胞板,这说明微丝与囊泡之间可能在功能上存在着密切的联系。进一步,我们通过药理学实验观察了微丝骨架动态变化与囊泡运动的关系:当用较低浓度微丝解聚特异药物latrunculin B(Lat B200 nM)处理有丝分裂中期的细胞时,成膜体及细胞板的起始过程受到了延迟,且成膜体的后期扩张受到抑制;当用高浓度Lat B(1μM)处理中期的细胞时,细胞周期的进行受到了完全的阻抑;当我们用囊泡分泌抑制剂Brefeldin A(BFA)对细胞进行短时间处理后观察到在成膜体起始及后期扩张过程中微丝列阵的排布都受到了影响,但胞质分裂仍然能够继续进行。用BFA对细胞进行长时间(120 min)处理后的结果表明,微丝在成膜体起始过程中的动态变化受到了明显的干扰。我们的研究结果清晰的显示了微丝及囊泡在成膜体起始过程中的动态变化,并且它们在结构和功能上存在着密切的联系,这种联系在细胞板的形成过程中发挥着重要的作用。