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目的:基于RNA-seq技术的转录组学分析,研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对视网膜血管内皮细胞的影响,通过比较CTGF刺激时差异表达基因,和模拟糖尿病患者anti-VEGF治疗状态下抑制CTGF表达时视网膜血管内皮细胞(RF6A)的差异表达基因,研究差异表达基因与纤维化调节过程的关系,为研究细胞内“血管-纤维化开关”分子机制提供参考依据,为探索增殖性糖尿病视网膜病变靶向治疗提供可能的参考价值。方法:将RF6A细胞分成4组:1:Control组;2:CTGF组;3:HG+anti-VEGF组;4.:HG+anti-VEGF+anti-CTGF组。Control组VS CTGF组(1VS2);HG+anti-VEGF组VS HG+anti-VEGF+anti-CTGF组(3VS4)。运用RNA转录组分析技术对细胞进行全转录组测序,利用Gene Ontology、DAVID及KEGG等数据库,对差异表达基因及功能富集分析,分析部分显著差异表达基因在生物学上的作用和影响。结果:通过RNA转录组分析技术得到CTGF诱导血管内皮细胞的差异基因表达谱,比较两组的测序结果发现:1.Control组VS CTGF组:325个差异表达基因,其中上调基因152个,下调基因173个;2.HG+anti-VEGF组VS HG+anti-VEGF+anti-CTGF组:1337个差异表达基因,其中上调基因419个,下调基因918个。GO分析显示基因功能主要包括以下几类:信号传递、能量代谢、蛋白合成等。Pathway显著性富集分析结果示:涉及通路主要包括:神经配体-受体互作通路、胰岛素信号通路、细胞因子-受体互作通路、细胞粘附分子通路、肌动蛋白细胞骨架调节通路、细胞外基质受体互作通路、等级信号通路和MAPK信号通路。差异基因中,SLC12A5与基础及葡萄糖刺激的胰岛素分泌调节有关;RET、CNTD2与肿瘤细胞的迁移有关;PFKFB3与细胞增殖迁移和血管新生有关;KRT14与形成角质及细胞骨架相关;RASAL1、ALK、BAG3、KLF10、FBN2的差异性表达与纤维化过程相关;UGCG与细胞的增殖和凋亡相关。结论:CTGF不同表达水平下基因差异表达涉及广泛生物学过程。差异基因之间可能存在协同或拮抗作用。CTGF刺激时RASAL1、ALK下调;高糖anti-VEGF抑制CTGF表达时,BAG3、KLF10上调,FBN2下调,皆参与TGF-β信号通路介导的纤维化过程,提示我们在TGF-β信号通路中有多个基因或因子同时调节纤维化过程,最终达到纤维化的动态平衡稳定状态。我们模拟RF6A高糖环境诱导新生血管,anti-VEGF治疗条件下,敲低CTGF表达,可以抑制纤维化过程,为双靶点治疗糖尿病纤维化提供理论支持,提示BAG3、KLF10、FBN2基因可能为双靶点治疗纤维化提供可能的基因靶点,但这些基因涉及的信号通路及作用机制都需要我们进行进一步实验验证。CTGF对视网膜血管内皮细胞的影响是多层次、多方面的,通过差异基因表达影响EMT、纤维化、参与调节血糖水平以及增殖与凋亡过程等,从而影响视网膜血管内皮细胞的功能。