食管癌环境影响因素筛选与β-胡萝卜素、维生素D对食管癌发生的影响及其机制研究

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目的:探讨江苏省淮安楚州食管癌高发区食管癌发生的影响因素,了解β-胡萝卜素和维生素D3与食管癌的关系,进一步明确β-胡萝卜素和维生素D3对食管癌EC9706细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并对β-胡萝卜素和维生素D3的联合抑制EC9706细胞生长的作用进行初步研究,为将β-胡萝卜素和维生素D3用于食管癌的预防和治疗以及在当地开展食管癌防治工作提供科学依据,以达到降低食管癌发病率和死亡率的目的。 方法:(1)采用1:2匹配的病例对照研究方法,对该地人群进行基本情况、疾病史、日常饮食史、家族史、吸烟史、饮酒史等调查,对食管癌相关影响因素进行Logistic回归分析,并根据膳食调查结果计算该人群各类食物和膳食营养素摄入情况,比较食管癌病例组和对照组的差异,将两组间有显著性差异的营养素摄入量按其四分位数分为四个等级,估计各营养素不同摄入水平对食管癌发生的OR值;(2)利用HPLC同时测定调查对象血清中β-胡萝卜素和维生素D3的含量,并利用美国食物β-胡萝卜素数据库计算调查对象β-胡萝卜素的摄入量,比较食管癌病例组和对照组间的差异,并计算血清中β-胡萝卜素和维生素D3不同含量水平对食管癌发生的OR值;(3)用含不同浓度β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3的培养液处理体外培养的EC9706细胞,采用MTT比色法和流式细胞术研究β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3对EC9706细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。 结果:(1)Logistic回归分析发现,人均月收入低、BMI偏低、既往食管病变、不按时进餐、十年前喜食辣食、十年前喜食烫食、喜食肥肉、不吃大蒜、肿瘤家族史可能是该地食管癌的危险因素。(2)食管癌病例组每日畜禽肉类食物摄入量显著高于对照组,对照组每日葱蒜类食物摄入量显著高于病例组。(3)对照组每日能量、蛋白质、碳水化合物、硫胺素、烟酸、钙、磷、镁等营养素摄入量显著高于病例组。能量、蛋白质、碳水化合物、硫胺素、烟酸、钙、磷、镁摄入最高的四分之一者与摄入最低的四分之一者相比其对食管癌的OR值分别为0.414、0.492、0.411、0.565、0.262、0.491、0.469、0.493,与食管癌发生呈负相关关系。(4)对照组血清β-胡萝卜素、维生素D3含量均显著高于病例组,血清β-胡萝卜素、维生素D3含量最高的四分之一者与含量最低的四分之一者相比其对食管癌的OR值均为0.127。(5)β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3和β-胡萝卜素+1,25(OH)2D3联合用药对EC9706细胞均表现出抑制作用,且联合用药组对EC9706细胞的抑制作用显著强于各单独用药组。(6)β-胡萝卜素和1,25(OH)2D3均能够引起EC9706细胞周期改变,其中β-胡萝卜素主要将EC9706细胞阻滞在S期,而1,25(OH)2D3及联合用药主要将EC9706细胞阻滞在G1期。(7)β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3和β-胡萝卜素+1,25(OH)2D3联合用药均能促进EC9706细胞凋亡,且β-胡萝卜素+1,25(OH)2D3联合用药组促进EC9706细胞凋亡的作用比各单独用药组强,同浓度下,β-胡萝卜素促进EC9706细胞凋亡的作用比1,25(OH)2D3强。 结论:(1)饮食习惯、膳食营养、既往食管病变、肿瘤家族史等是当地食管癌主要的影响因素,可以通过改变不良饮食习惯,注意膳食结构来预防食管癌的发生,并加强对有食管病变和肿瘤家族史的高危人群进行筛查,以早期发现食管癌,提高生存率。(2)β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3能够抑制食管癌EC9706细胞生长,且联合用药效果比单独用药好,可以将β-胡萝卜素、1,25(OH)2D3联合用于食管癌的预防和治疗。
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